細胞簡介：

大鼠陰道上皮分離自陰道組織 ；陰道位於膀胱 、尿道和直腸之間 ，是一個富有彈性的管狀器官 。它在人類生殖過程中具有多種生理功能 ，是連接子宮與外陰的通道 ，是排出月經血 、娩出嬰兒的必經之路 ，也是一個重要的性交器官 。陰道壁按組織學由外到內分三層 ，即黏膜層 、肌層和外膜 ，陰道黏膜是外層 ，也就是淺表的那一層 ，相當於皮膚的外麵層一樣 。陰道上皮呈粉紅色 ，表麵為複層鱗狀上皮 ，但無角化層 。在正常的月經周期中 ，陰道上皮脫落的上皮細胞的形態隨著卵巢內分泌的變化而改變 ，因此通過陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內分泌功能狀況 。陰道粘膜是指陰道內壁分泌的保持陰道內壁表麵濕潤 ，保持表麵活力的粘液膜層 ，因為其表麵多粘稠 ，故為粘膜 。在卵泡期 ，陰道粘膜受雌激素作用 ，上皮增厚 ，表皮細胞角化 ；陰道上皮細胞內糖原豐富（注 ：陰道粘膜上皮是複層扁平上皮又名“複層鱗狀上皮"） ，在陰道杆菌作用下分解為乳酸 ，保持陰道的酸性環境 ；排卵後 ，受孕激素作用 ，陰道粘膜上皮大量脫落 ，角化現象消失 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的大鼠陰道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法 ，並通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠陰道上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠蛋白激酶C(PKC)檢測試劑盒  ，英文名 ： PKC ELISA Kit

Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)檢測試劑盒

病毒H7亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關0脂酶A2

通用石蠟切片HRP酶聯檢測封閉溶液10毫升

ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環肽

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環肽

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶原激活物抑製因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)檢測試劑盒

Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP檢測試劑盒雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠陰道上皮細胞小鼠血管內皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T   美國 R&D

小鼠血管內皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T   美國 R&D

大鼠Active Caspase-3   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

大鼠Active Caspase-7   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。