老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：大鼠嗅鞘细胞

英文名称
：Rat Olfactory Ensheathing Cells

组织来源
：嗅球组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

大鼠嗅鞘分离自嗅球组织；嗅鞘细胞（OECs）是在功能上介于施旺细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞，具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等；为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性，使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。嗅鞘细胞是目前所发现的极少数的中枢神经系统可以再生细胞之一
，其特点为终身具有神经再生功能，还能够释放多种神经营养因子

、神经粘附分子
。被认为是髓鞘化能力强的胶质细胞，逐渐用于治疗脊髓损伤。嗅鞘细胞与胶质细胞、雪旺细胞在表现型上有共同点，它们都能促进轴突的再生，主要区别在于嗅鞘细胞不但存在于中枢神经系统，也存在于外周神经中。嗅鞘细胞被认为是一种可塑性很高的细胞，它可表现出多种细胞形态和细胞表面标志，在嗅系统发育过程中，嗅鞘细胞根据其在组织定位的不同而有不同的抗原表型，其中P75NTR、GFAP
、和O4可标记大部分在体嗅鞘细胞，然而在嗅球外神经层O4阳性嗅鞘细胞仍然可以在P75NTR阳性细胞层内分化成E-NCAM阳性的细胞层，还有一定比率的嗅鞘细胞P75NTR阴性而NY和S100表型为阳性。嗅黏膜中的神经元是生后才生长并在成年时继续分化的神经元，寿命为4-12周，随着新细胞的生长，又建立了新的神经支配关系。嗅鞘细胞存在于嗅神经及嗅球的神经层上，沿嗅神经的全长
，从周围神经系统到中枢神经分布。

公司实验室分离的大鼠嗅鞘采用-胶原酶联合消化法、结合差速贴壁法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的大鼠嗅鞘经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大

，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠小白蛋白(PVALB)检测试剂盒 ，英文名

： PVALB ELISA Kit

Pla vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 植物B6(VB6)检测试剂盒

MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 小鼠前列腺素E2(PGE2)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanai-cailage-aibodyELISAKit人抗软骨抗体

细胞GSK3β激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitLH大鼠促黄体激素

CTSL1重组人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein

内皮脂肪酶(LIPG)重组蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

PILRA重组人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 标签) Protein

CD5L Protein Human 重组人 CD5L / API6 蛋白

NP Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP

内皮脂肪酶(LIPG)重组蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

CD5L Protein Human 重组人 CD5L / API6 蛋白

CTSL1重组人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein

NP Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP

PILRA重组人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human granulocyte chemotactic protein -2 (GCP-2/CXCL6) ELISA Kit 人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)检测试剂盒

Humandermatansulfate,DSELISAKit 人硫酸皮肤素(DS)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Chicken1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu检测试剂盒鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)检测试剂盒规格

：96T/48T

远西方杂交(FARWESTERNBLOT)印迹同位素检测试剂盒5次

MouseIgGELISAKit小鼠IgG检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠嗅鞘细胞小鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血纤蛋白原(Fbg)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血栓素B2(TXB2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血栓素A2（TXA2）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行

。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用