老哥俱乐部

细胞简介：

大鼠全骨髓分离自骨髓
；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞
、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体
，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体
。因此，骨髓不但是造血器官
，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中
，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔
，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。全骨髓细胞即骨髓内除红细胞外的全部细胞
。

方法简介
：

实验室分离的大鼠全骨髓采用冲洗骨髓、红细胞裂解法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠全骨髓经过检测
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂

、Penicillin


、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：悬浮

细胞形态：圆形

传代特性

：不增殖
；不传代

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠全骨髓体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的培养状态。

实验报告
：

一、分离与培养
：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液

，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基

，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次

，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5

、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠多巴胺(DA)检测试剂盒
，英文名： DA ELISA Kit

Porcine heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 猪热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒

马特定基因序列(Hor)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforLTC4(MouseLeukoieneC4)ELISAKit小鼠白三烯C4

体液总巯基含量荧光定量检测试剂盒20次

ELISAKitADM鸡肾上腺髓质素

CDH15重组大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 标签) Protein

GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖转运蛋白3抗原

RHOA重组人 RhoA 蛋白 Protein

CD247 Protein Human 重组人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 标签)

CCL8 Protein Mouse 重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签)

GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖转运蛋白3抗原

CD247 Protein Human 重组人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 标签)

CDH15重组大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 标签) Protein

CCL8 Protein Mouse 重组小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 标签)

RHOA重组人 RhoA 蛋白 Protein

小鼠氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)检测试剂盒 96T/48T

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)检测试剂盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶

饮料比色法定量检测试剂盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠全骨髓细胞小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶检测试剂盒   小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒   规格型号
：96T/48T   小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒，规格型号：96T/48T

，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶试剂盒、小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠致癌基因相关蛋白检测试剂盒   小鼠致癌基因相关蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠致癌基因相关蛋白试剂盒，规格型号
：96T/48T

，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：小鼠致癌基因相关蛋白试剂盒、小鼠致癌基因相关蛋白检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠脂联素检测试剂盒   小鼠脂联素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠脂联素试剂盒，规格型号
：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠脂联素试剂盒、小鼠脂联素检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月
。

小鼠脂蛋白检测试剂盒   小鼠脂蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠脂蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠脂蛋白试剂盒、小鼠脂蛋白检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。