細胞簡介 ：

大鼠全骨髓分離自骨髓 ；骨髓是機體的造血組織 ，位於身體的許多骨骼內 。成年動物的骨髓分兩種 ：紅骨髓和黃骨髓 。紅骨髓能製造紅細胞 、血小板和各種白細胞 。血小板有止血作用 ，白細胞能殺滅與抑製各種病原體 ，包括細菌 、病毒等 ；某些淋巴細胞能製造抗體 。因此 ，骨髓不但是造血器官 ，它還是重要的免疫器官 。骨髓是存在於長骨（如肱骨 、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀鬆骨質間的網眼中 ，是一種海綿狀的組織 ，能產生血細胞的骨髓略呈紅色 ，稱為紅骨髓 。出生時 ，紅骨髓充滿全身骨髓腔 ，隨著年齡增大 ，脂肪細胞增多 ，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代 ，最後幾乎隻有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓 。全骨髓細胞即骨髓內除紅細胞外的全部細胞。

方法簡介 ：

實驗室分離的大鼠全骨髓采用衝洗骨髓 、紅細胞裂解法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠全骨髓經過檢測 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：懸浮

細胞形態 ：圓形

傳代特性：不增殖 ；不傳代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

大鼠全骨髓體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種於25cm2培養瓶，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠多巴胺(DA)檢測試劑盒  ，英文名 ： DA ELISA Kit

Porcine heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒

馬特定基因序列(Hor)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTC4(MouseLeukoieneC4)ELISAKit小鼠白三烯C4

體液總巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitADM雞腎上腺髓質素

CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉運蛋白3抗原

RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein

CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)

GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉運蛋白3抗原

CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)

CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)

RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein

小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)檢測試劑盒 96T/48T

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶

飲料比色法定量檢測試劑盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠全骨髓細胞小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶檢測試劑盒   小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名 ：小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 、小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠致癌基因相關蛋白檢測試劑盒   小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 、小鼠致癌基因相關蛋白檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠脂聯素檢測試劑盒   小鼠脂聯素試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠脂聯素試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠脂聯素試劑盒 、小鼠脂聯素檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

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注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。