細胞簡介 ：

大鼠肌腱幹分離自肌腱組織 ；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結締組織 ，便於肌肉附著和固定 。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上 ，是由於肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動 。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分 ，肌腹由肌纖維構成 ，色紅質軟 ，有收縮能力 ，肌腱由致密結締組織構成 ，色乳白較硬 ，沒有收縮能力 。肌腱把骨骼肌附著於骨骼 。長肌的肌腱多呈圓索狀 ，闊肌的肌腱闊而薄 ，呈膜狀 ，又叫腱膜 。此處的肌腹即為通常所說的紅肌 ，而肌腱即為白肌 ，分別控製肌肉的力量 、爆發力和耐力 。肌腱幹細胞（TSCs）是一種來源於肌腱組織的間充質幹細胞 ，其具有多向分化潛能 ，並且在外源性前列腺素E2作用下異常分化 。體外培養時該細胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等幹細胞的普遍特性 。肌腱幹細胞可以被誘導向脂肪細胞、軟骨樣細胞 、骨細胞分化 ；在裸鼠模型中 ，肌腱幹細胞還可以形成肌腱樣組織，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等 。相比骨髓間充質幹細胞而言 ，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力 ，軟骨相關基因和肌腱相關基因表達更高 ，具有更好的成骨 、成脂和成軟骨能力 ，因此可以作為組織工程中的種子細胞 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的大鼠肌腱幹采用膠原酶 、混合消化法並通過肌腱幹細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠肌腱幹經CD44免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

人組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抵抗素(Resistin)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人骨鈣素/骨穀酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠環0酸鳥苷(cGMP)試劑盒  ，英文名 ： cGMP ELISA Kit

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CLIAKitforbFGF-4ELISAKit大鼠堿性成纖維細胞生長因子4

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RabbitIerleukin17,IL-17ELISAKit兔白介素17(IL-17)試劑盒規格 ：96T/48T

B18R重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白 Protein

TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mgTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑製因子-2(抗原)

TIGIT重組人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein

IL20RA Protein Human 重組人 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

MAPK14 Protein Human 重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白

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TIGIT重組人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein

大鼠肌腱幹細胞小鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒

Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)試劑盒

HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanc-fos試劑盒人c-fos試劑盒規格 ：96T/48T

轉基因玉米MON863品係基因定量試劑盒20次

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒規格 ：96T/48T

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。