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大鼠骨骼肌成纖維細胞

產品名稱 :大鼠骨骼肌成纖維細胞

產品特點 :大鼠骨骼肌成纖維細胞公司正在出售的產品BALB/3T3 clone A31細胞 ,小鼠胚胎成纖維細胞 L1210(白血病細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0901 FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液 HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞

產品型號 :

更新日期 :2024-12-10

訪問次數 :30

大鼠骨骼肌成纖維細胞的詳細資料 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞

實驗報告 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞
一 、分離與培養 :

1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;

3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次,直至組織被消化 ;

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃  ,5%CO2 培養箱中培養 ;

5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;

2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;

3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;

5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;

6 、用PBS衝洗3次 ,每次10min ,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

細胞簡介 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞

大鼠骨骼肌分離自四肢肌肉組織 ;骨骼肌又稱橫紋肌 ,肌肉中的一種 ,約占全身重量的40% 。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞 ,肌膜的外麵有基膜緊密貼附 。屬於橫紋肌 ,橫紋肌還包括心肌與內髒橫紋肌 ,其中骨骼肌主要分布於四肢 。每塊肌肉都是具有一定形態 、結構和功能的器官 ,有豐富的血管 、淋巴分布 ,在軀體神經支配下收縮或舒張 ,進行隨意運動 。肌肉可根據共形狀 、大小 、位置 、起止點 、纖維方向和作用等命名 。依形態命名的如斜方肌 、菱形肌 、三角肌 、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀 ,不分支 ,有明顯橫紋 ,核很多 ,且都位於細胞膜下方 。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維 。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶) 。明帶染色較淺 ,而暗帶染色較深 。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線 。H線的中部有一M線 。明帶中間 ,有一條較暗的線稱為Z線 。兩個Z線之間的區段 ,叫做一個肌節 。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞 ,細胞呈纖維狀 ,不分支 ,有明顯橫紋 ,核很多 ,且都位於細胞膜下方 ,細胞多呈梭行 ,具有一定的方向性 。

產品名稱

大鼠骨骼肌成纖維細胞

組織來源

骨骼肌組織

英文名稱

Rat Skeletal   Muscle Fibroblast Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維采用-膠原酶混合酶消化後差速貼壁製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等。

培養信息 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右 ;3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%

大鼠骨骼肌成纖維細胞

注意事項 :

大鼠骨骼肌成纖維細胞
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ,培養液是否有漏液 、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代  。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。

公司正在出售的產品 :
大鼠骨骼肌成纖維細胞

致病性大腸杆菌(EPEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

單增李斯特菌(LM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

球菌(SA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬β幹擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒

Human ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒

Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit 豬白介素3(IL-3)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗人絨毛膜抗體

血液牛病毒性腹瀉病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR擴增試劑盒20

MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit小鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細胞介素5抗原

CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標簽) Protein

AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標簽)

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細胞介素5抗原

AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標簽)

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠骨骼肌成纖維細胞小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒

Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒

Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)試劑盒 進口分裝

HumanAlpha-fetoprotein,AFP試劑盒人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

植物半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20

Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒


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