产品名称：重组人Dickkopf相关蛋白1（DKK-1）
产品特点 ：重组人Dickkopf相关蛋白1（DKK-1）的相关产品：GPA33(glycoprotein A33 transmembrane 0.5mgGPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原CXCL10 Protein Human 重组人 CXCL10 / Crg-2 蛋白COLEC12重组大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 Prote
产品型号 ：
更新日期：2024-11-19
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重组人Dickkopf相关蛋白1（DKK-1）的详细资料 ：
产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性 ：
产品英文名称 ：Human DKK-1 Protein
产品中文名称 ：重组人Dickkopf相关蛋白1（DKK-1）
规格：10 μg/500 μg/100 μg/1 mg
货号：EY-01X8725
用途 ：仅供科研研究实验
特点&优势:
表达宿主:大肠杆菌
种属:人
序列:氨基酸序列来源于： 表达人DKK-1 (Thr32-His266) (O94907)。
蛋白长度：重组人DKK-1由235个氨基酸组成，预测分子量为25.8 kDa。
纯度:> 98 % ，使用SDS-PAGE检测
通过LAL法测定，每微克蛋白里内毒素含量<1 EU 。
产品形式:冻干粉，冻干缓冲液为无菌的PBS.
基因ID:22943
使用中注意事项:开盖使用前，请先离心 。本产品为冻干粉 ，推荐用该产品配套的Reconstitution Buffer进行复溶，且浓度不低于1动겸动
背景
Human DKK-1 (Dickkopf related protein 1) is a secreted antagonist of Wnt/beta-Catenin signaling. It interacts with LRP-6, and internalized complexes of DKK-1/LRP-6/Kremen 2 can downregulate Wnt signaling. The balance between Wnt signaling and Human DKK-1 inhibition is critical for bone formation and homeostasis. In addition, Human DKK-1 can act as either a tumor suppressor or promoter of metastasis.
本产品具有下列特点:
1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤 。
2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。
3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物 。
4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成 。
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CIB2 Protein Human 重组人 CIB2 / KIP-2 蛋白
LAYN Protein Rat 重组大鼠 Layilin / LAYN 蛋白
操作步骤：
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段 。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体 。
(三) 获得含重组表达质粒的表达菌种
1 、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定 。
2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3 、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
(四)诱导表达
1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。
2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。
3 、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4 、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min 。
5 、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
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