老哥俱乐部

产品仅供研究使用
，不适用于人类或临床诊断
商品属性
：

产品英文名称：Human CNTF protein

产品中文名称

：重组人睫状神经营养因子（CNTF）

规格
：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

货号：EY-01X8635
用途
：仅供科研研究实验

特点&优势:

标签:无标签

表达宿主:大肠杆菌

种属:人

序列:氨基酸序列来源于
：人源 CNTF(P26441)(Ala2-Met200) 表达的蛋白片段。

蛋白长度
：重组人CNTF由199个氨基酸组成
，预测分子量为22 KD。

纯度:> 98 % 
，使用SDS-PAGE检测

采用 LAL 法检测，每 1 μg 蛋白质中的 EU 含量小于 0.1。

产品形式:冻干粉，冻干缓冲液为无菌的 PBS

，pH 7.5
。

基因ID:1270

使用中注意事项:开盖使用前，请先离心。本产品为冻干粉，推荐用该产品配套的Reconstit动겸动

背景

睫状神经营养因子（Ciliary neurotrophic factor, CNTF）作为细胞因子家族成员之一，是一种多功能细胞因子，其对神经细胞的生长
、分化具有明显的营养作用。CNTF广泛分布于神经系统，具有广谱营养作用，如：运动神经元

、感觉神经元、交感神经元
、副交感神经元、海马神经元
、少突胶质细胞，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性
。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物

。

3. 与MTT相比,使用更安全
。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成
。
公司正在出售的产品：

Argireline peptide 抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3 1gArgireline peptide 抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3

GAD1 Protein Human 重组人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 标签)

CNDP2重组小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 标签) Protein

ACVR1 Protein Rat 重组大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白

GNGT1重组人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 试剂盒

Human aspaate aminoansferase / aspaate aminoansferase (GOT/GPT) ELISA Kit 人天门冬转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)检测试剂盒

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)检测试剂盒 进口分装

Humanbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin检测试剂盒人脑肠肽(BGP/Gehrelin)检测试剂盒

植物组织微粒体分离试剂盒20次

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit人脾脏酪激酶(Syk)检测试剂盒

兔子纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

大鼠血小板衍生生长因子A(PDGFA)检测试剂盒 ，英文名： PDGFA ELISA Kit

Mouse coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit 小鼠Ⅸ(FⅨ)检测试剂盒

Mousehepatocytegrowthfactor,HGFELISAkit 小鼠肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforHumancoagulationfactorVIIIrelatedaigen,FVIII-AgELISAKit人Ⅷ相关抗原

细胞CDK5/P25激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitIP-10/CXCL鼠干扰素诱导蛋白10

重组人睫状神经营养因子（CNTF）CNDP2重组小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 标签) Protein

Argireline peptide 抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3 1gArgireline peptide 抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3

GNGT1重组人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 标签) Protein

GAD1 Protein Human 重组人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 标签)

ACVR1 Protein Rat 重组大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白

操作步骤：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段
。

2
、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物
。

(二)构建重组表达载体

1
、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体
。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定
。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点

。

3
、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)
。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5

、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。