老哥俱乐部

产品仅供研究使用
，不适用于人类或临床诊断
商品属性

：

产品英文名称：5(6)-CFDA, SE

产品中文名称
：5(6)-CFDA, SE

规格
：5mg/50 mg

货号：EY-01X8568
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  λEX/λEm: 494/521。（pH=7）

产品形式白色或浅黄色固体

使用中注意事项•  可溶于DMSO
。

保存建议:-20℃，避光保存12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

5(6)-CFDA, SE是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料，不仅可用于细胞增殖的体外实验
，还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程
。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板
。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤
。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成
。
公司正在出售的产品
：

Aggrecan 软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原

CD96 Protein Human 重组人 CD96 蛋白

REG3D重组小鼠 REG3D 蛋白 Protein

IFNA4 Protein Rat 重组大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签)

C7重组人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein

小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保护素(OPG)检测试剂盒

Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羟化酶(DBH)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenHeatShockProtein20,HSP-20检测试剂盒鸡热休克蛋白20(HSP-20)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠血管紧张素原(aGT)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠血管活性肠肽(VIP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)检测试剂盒 ，英文名： BMP-4 ELISA Kit

Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)检测试剂盒

2型脊髓灰质病毒(PV-2)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素

体液离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitE犬雌激素

5(6)-CFDA, SECNDP1重组小鼠 CNDP1 蛋白 Protein

玻连蛋白(VTN)重组蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)

PPCDC重组人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein

CD96 Protein Human 重组人 CD96 蛋白

RBP4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 RBP4 蛋白

操作步骤：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1
、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1
、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1
、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3
、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr
。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。