產品僅供研究使用 ，不適用於人類或臨床診斷
商品屬性 ：

產品英文名稱 ：Hoechst 33342

產品中文名稱 ：Hoechst 33342

規格 ：10mg/100 mg

貨號 ：EY-01X8565
用途 ：僅供科研研究實驗

特點&優勢:

•   λEx/λEm: 350/461 nm(結合DNA) ，346/460 nm(未結合DNA) 。

產品形式黃色固體

使用中注意事項•  可溶於水 。

保存建議:-20℃ ，避光保存12個月 。

運輸條件:藍冰運輸

背景

Hoechst 33342是一種非嵌入性的亮藍色熒光染料 。Hoechst染料在細胞周期和凋亡研究中被廣泛應用 ，也被廣泛應用於核複染色 。

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便 、快捷 。可直接加入到檢測平板 。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟 。

2. 無放射性 。不需要配製液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全 。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臢產物 。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數後可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成 。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1 、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上遊和下遊引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段 。

2 、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物 。

(二)構建重組表達載體

1 、載體酶切:將表達質粒用限製性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段 。

2 、PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體 。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1 、 將連接產物轉化大腸杆菌DH5α,根據重組載體的標誌(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定 。

2 、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作 。否則應篩選更多克隆,重複亞克隆或亞克隆至不同酶切位點 。

3 、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞 。

(四)誘導表達

1 、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養 。

2 、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr) 。

3 、取部分液體作為未誘導的對照組,餘下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr 。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉澱,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min 。

5 、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析 。

公司正在出售的產品 ：

Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒

Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗複合物(TAT)檢測試劑盒

HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大內皮素(BigET)檢測試劑盒 進口分裝

HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2檢測試劑盒人腺苷三0酸結合盒轉運體G2(ABCG2)檢測試劑盒

植物源性食品腰果(cashew)試劑盒20次

HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)檢測試劑盒

C（VC）檢測   Vitamin B2 (VB2) detection

B1（VB1）檢測   The total amino acid (TAA) detection

B2（VB2）檢測   Detection of malic dehydrogenase

總基酸（T－AA）檢測   Hydroxyproline sample preeatme

大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)檢測試劑盒  ，英文名 ： W5A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)檢測試劑盒

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20

細胞MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12

Hoechst 33342AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein

Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)

CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白