老哥俱乐部

产品仅供研究使用
，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称
：Cell Cycle Staining Kit

产品中文名称：细胞周期染色分析试剂盒

规格：50T/100T

货号
：EY-01X8548
用途
：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  流式分析：细胞周期状态

•  提供即用型细胞染色试剂

•  通用的检测通道：Ex/Em=535/615 nm.

保存建议:自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

细胞周期是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程

。在这个过程中，细胞遗传物质复制并加倍，且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去
。细胞周期又可以分为间期和有丝分裂期
，细胞间期常划分为休眠期（G0）
，DNA合成前期（G1）
，DNA合成期（S）
，DNA合成后期（G2），整个周期可表示为G1→S→G2→M。DNA周期检测可用来反应细胞周期的各个期的状况，即细胞增殖状况。随着细胞在细胞周期中的进展

，G1期细胞具有一组配对的染色体，并且就DNA含量而言是均一的。 另一方面，在S期期间DNA的量开始加倍，因此DNA的量是G1中的量的1-2倍。 与G1中的细胞和两组配对的染色体相比，

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷
。可直接加入到检测平板
。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全
。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成
。
公司正在出售的产品：

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.1mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促肾上腺皮质激素(1-39)(抗原)

FCGR3B Protein Human 重组人 CD16b / FCGR3B 蛋白

KIRREL3重组小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 标签) Protein

IL2RG Protein Rat 重组大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

APOL1重组人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠对基苯(PABA)ELISA 试剂盒

Human acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)检测试剂盒

Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit 人血小板相关补体3(PAC3)检测试剂盒 进口分装

HumanAquaporin4,AQP-4检测试剂盒人水通道蛋白4(AQP-4)检测试剂盒

植物异柠檬酸脱氢酶(isociatedehydrogenase;IDH)电泳分析试剂盒5次

Humahyroxine，T4ELISAKit人甲状腺素(T4)检测试剂盒

(Cytochrome C)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

CXC 趋化因子受体 1(CXCR1)   作用
：   ELISA   规格
：      进口分装

CXCR3(CXCR-3)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

人 CXCL-11(I-TAC)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

大鼠尾加压素2受体(S2R)检测试剂盒 
，英文名
： S2R ELISA Kit

Mouse fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)检测试剂盒

MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 小鼠白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforHSCCAg-2(umanSquamousCellCarcinomaAigen2)ELISAKit人鳞状上皮细胞癌抗原2

细胞NLK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitβ-EP大鼠β内啡肽

细胞周期染色分析试剂盒PTN重组小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白  Protein

催乳素诱导蛋白(PIP)重组蛋白 Recombinant Prolactin Induced Protein (PIP)

CD22重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 标签) Protein

FCGR3B Protein Human 重组人 CD16b / FCGR3B 蛋白

KLRK1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 标签)

操作步骤
：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2
、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物
。

(二)构建重组表达载体

1
、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段
。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2
、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)
。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr
。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。