老哥俱乐部

产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性
：

产品英文名称：Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1)

产品中文名称：线粒体膜电位分析试剂盒（JC-1法）

规格：20T/100T/500T

货号：EY-01X8532
用途

：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  作为细胞健康的指标，检测线粒体膜电位。

•  使用JC-1，一种荧光
，亲脂
，阳离子染料
。

•  红色荧光表示健康的线粒体，绿色荧光表明健康状况不佳的线粒体。

•  针对流式细胞仪或荧光显微镜进行了优化。

•  含有CCCP（强效线粒体氧化磷酸化解偶联剂）。

保存建议:请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月
。

运输条件:蓝冰运输

背景

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过 JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降

，同时也可以用 JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标
。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便
、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性

。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品
：

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羟色胺受体4抗原

CAMKV Protein Human 重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签)

EREG重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签) Protein

IL18R1 Protein Rat 重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签)

ING5重组人 ING5 蛋白 (GST 标签) Protein

鸭白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai neuroblastoma aibody (NB-Ab) ELISA Kit 人抗神经母细胞瘤抗体(NB-Ab)检测试剂盒

HumanGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 人γ氨基(GABA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAChRab(Humanacetylcholinereceptoraibody)ELISAKit人乙酰受体抗体

盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒5/10次

Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒规格
：96T/48T

羊阶段特异性表面抗原-1检测试剂盒   羊阶段特异性表面抗原-1试剂盒   规格型号
：96T/48T   羊阶段特异性表面抗原-1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：羊阶段特异性表面抗原-1试剂盒、羊阶段特异性表面抗原-1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

鸭主要组织相容性复合体检测试剂盒   鸭主要组织相容性复合体试剂盒   规格型号
：96T/48T   鸭主要组织相容性复合体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），动겸动

大鼠胱抑素SN(CST1)检测试剂盒 ，英文名
： CST1 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 兔载脂蛋白A1(apo-A1)检测试剂盒

甲型流感病毒H1亚型(IAV-H1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMMP-8ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶

体液基质金属蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitThymosinα1犬α1

线粒体膜电位分析试剂盒（JC-1法）EREG重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签) Protein

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羟色胺受体4抗原

ING5重组人 ING5 蛋白 (GST 标签) Protein

CAMKV Protein Human 重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签)

IL18R1 Protein Rat 重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签)

操作步骤：

(一)获得目的基因

1
、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2

、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物
。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2

、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3
、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1
、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2
、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)
。

3
、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min
。

5
、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析
。