老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃

，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒
。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称：肝配蛋白A1ELIS检测试剂盒
英文名称：Ephrin A1
产品货号
：EY-E97664
产品规格
：48T/96T
产品保存

：2-8℃
，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本
，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆
，细胞培养上清液，尿液
，组织匀浆,心房水标本等等
。 

样品收集

、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离


。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒

。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用

，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
。

小鼠肺血管平滑肌细胞*培养基100mL

T/G HA－VSMC(人血管平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2

戊糖杆菌 Lactobacillus pentosusNCI-H2452(人间皮瘤细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠前列腺上皮细胞*培养基

真核翻译起始因子6(EIF6)重组蛋白Recombinant Eukaryotic Translation Initiation Factor 6 (EIF6)

Hepa 1-6(小鼠肝细胞)5×106cells/瓶×2

黑曲霉 Aspergillus niger苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

沙氏1%葡萄糖琼脂培养基/Sabouraud,s 1% Dextrose Aga上培养增菌的标准培养基，用于深浅部真菌的分离培养250克国产/进口

Andrade氏糖类肉汤/安德雷德氏糖类肉汤/Andrade,s Carbohydrate Broth细菌的糖发酵试验250克国产/进口

NCI-H295R(人肾上腺皮质腺细胞)口蘑 Tricholoma gambosum

K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞)5×106cells/瓶×2

肝配蛋白A1ELIS检测试剂盒小鼠β葡糖苷酶Beta-glucosidase(Mouse Beta-glucosidase ) ELISA Kit 96T

大鼠绒毛膜βBeta-CG ELISA Kit 96T

大鼠性激素结合球蛋白SHBG ELISA Kit 96T

小鼠多巴胺DA(Mouse dopamine) ELISA Kit 96T

人内皮型一氧化氮合成酶3eNOS-3(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 96T

小鼠高灵敏度促甲状腺激素U-TSH(Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone) ELISA Kit 96T

人丙二醛MDA(Human malondialchehyche) ELISA Kit 96T

大鼠脱氢表雄酮S7DHEA-S7 ELISA Kit 96T

大鼠脱氢表雄酮DHEA ELISA Kit 96T

人胰淀素Human Amylin ELISA Kit 96T

小鼠高敏甲状腺素u-T4(Mouse Ultrasensitivity Thyroxine) ELISA Kit 96T

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时
，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性

。有时本底较高，说明有非特异性反应

，可采用羊血清

、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体
，如聚氯乙烯、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等

。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）


。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全
、有明显地显色反应，而本身无色

。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体

。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入
。