老哥俱乐部

培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻


； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大

，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

细胞培养方法
：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2
、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3
、细胞冻存
：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

牛皮特征肽A CAS  规格：10mg/支 订购|咨询

秦皮甲素 CAS 531-75-9 规格


：HPLC≥98%，20mg/vial 订购|咨询

山羊豆碱;Galegine CAS 20284-78-0 规格：20mg 订购|咨询

金合欢素;刺槐素 CAS 480-44-4 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

新藤黄酸 CAS  规格
：20mg 订购|咨询

贝母甲素 CAS 23496-41-5 规格：20mg 订购|咨询

青阳参苷元B;Qingyangsheng CAS 106758-54-7 规格：20mg 订购|咨询

CAS 26833-87-4 规格

：20mg 订购|咨询

CAS 38821-53-3 规格：200mg 订购|咨询

普拉洛芬 CAS 52549-17-4 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

厚朴酚 CAS 528-43-8 规格：20mg 订购|咨询

Ketr-3细胞
，人肾癌细胞说明书磷酸化血管生成素受体2抗体 英文名称
：Phospho-TIE2 (Tyr1102) 0.2ml

激酶受体A抗体 英文名称
：TrkA 0.1ml

促甲状腺素释放激素抗体 英文名称：TRH 0.1ml

端粒酶逆转录酶抗体 英文名称：TERT 0.1ml

甲状腺激素反应蛋白抗体 英文名称
：THRSP 0.2ml

蛋白D54蛋白抗体 英文名称：TPD54 0.2ml

跨膜蛋白49抗体 英文名称
：TMEM49 0.2ml

四环素抗体 英文名称
：Tetracycline 0.2ml

坏死因子-α/TNFα抗体 英文名称：TNF alpha 0.1ml

踝蛋白抗体 英文名称：Talin 0.1ml

磷酸化踝蛋白抗体 英文名称

：Phospho-Talin (Ser425) 0.1ml