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W256細胞
,Walker氏癌肉瘤256瘤株說明書

產品名稱 :W256細胞 ,Walker氏癌肉瘤256瘤株說明書

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產品型號 :

更新日期 :2021-03-29

訪問次數 :558

W256細胞 ,Walker氏癌肉瘤256瘤株說明書的詳細資料 :

培養操作步驟  :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出 ,用無菌絲綢布擦拭幹淨 ,不要用紗布 ; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片) ; 
3.在距離紫外燈直射範圍內20-30 厘米處照射2-3小時 ; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中 ,使蓋玻片*浸在培養液中 ; 
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天 ,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3麵積時 ,將培養板取出 ,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片 ,用蒸餾水漂洗後即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測 。 

下列是產品的訂購信息 :

產品名稱

W256細胞 ,Walker氏癌肉瘤256瘤株說明書

英文名稱

W256 cells, Walker's cancer sarcoma 256 tumor lines

貨號

EY-X64299

細胞培養的優點 :
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中 ,根據要求可始終保持細胞活力,並可長時間監控 、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態 、結構 、生命活動等 。
2.研究條件可以人為控製
pH 、溫度 、氧氣 、二氧化碳 、張力等物理化學的條件 ,可以根據實際需要進行人為的控製 ,同時 ,可以施加化學 、物理 、生物等因素作為條件而進行實驗觀察 ,這些因素同樣可以處於嚴格控製之下 。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數後 ,所得到的細胞係則可以達到均一性而屬於同一類型的細胞 ,需要時 ,可采用克隆化等方法使細胞達到純化 。
4.研究內容便於觀察 、檢測和記錄
采用各種研究技術 :如倒置生物顯微鏡 、熒光顯微鏡 、電子顯微鏡 、流式細胞術 、激光共焦顯微鏡 、免疫組織化學 、原位雜交 、同位素標記等各種儀器設備 。

實驗要點及說明 :
1.本方法適用於貼壁細胞培養 ,而不適用於懸浮細胞培養 ,懸浮細胞可使用滴片法 ; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃 ,並經過鉻酸洗液處理 ; 
3.蓋玻片非常薄 ,易碎 ,取放蓋玻片時動作要輕 ; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞 ,可以使用較大的培養皿 ,但不宜過大 ,以避免培養液的浪費和增加汙染機率 ; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差 ,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹 。

細胞培養方法 :
1 、細胞傳代 :細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清 ,用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ;
②加入2ml0.25%(T25瓶) ,使覆蓋整個瓶或皿 ,蓋好放入培養箱消化 ;
③1-2min後 ,顯微鏡下觀察細胞 ,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ;若細胞還是貼壁 ,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止 ;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清 ;
⑤用新鮮培養基重懸後加入培養瓶或皿中 ,T25培養瓶加6-8ml培養基 ;
⑥懸浮細胞直接離心收集 ,細胞沉澱重懸後分到新培養瓶中 。
2 、細胞複蘇 :
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化 ,時間1min左右 ,加入4-5ml培養基混勻 。
②在1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清,加1-2ml培養基吹勻 ,將細胞懸液加入培養瓶中 ,補加適量培養基 。
3 、細胞凍存 :待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清 ,用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min後 ,顯微鏡下觀察細胞 ,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清 ,加1ml凍存液重懸細胞 ;
④將凍存管放入程序降溫盒 ,放入-80℃冰箱 ,4小時後將凍存管轉入液氮罐儲存 。

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人內皮抑素ES(Human Endostatin) ELISA Kit 96T

大鼠抗複合物TAT ELISA Kit 96T

小鼠血纖蛋白原Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit 96T

大鼠抗受體ATR ELISA Kit 96T

人鐵蛋白FE(Human ferritin) ELISA Kit 96T

小鼠血小板活化因子PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit 96T

人微量轉鐵蛋白MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit 96T

 

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