老哥俱乐部

细胞培养方法
：
1
、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）

，使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右

，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构

、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度
、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下
。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出

，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

(-)-白雀木醇;L-Quebrachi CAS 642-38-6 规格：10mg 订购|咨询

牛膝 CAS  规格：1g 订购|咨询

头孢噻呋 对照品 CAS  规格

：100mg;89.3％ 订购|咨询

格列喹 CAS 33342-05-1 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 CAS 23313-21-5 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

芳樟醇 CAS 78-70-6 规格
：20mg 订购|咨询

CAS  规格：50mg 订购|咨询

苯胍 对照品 CAS  规格
：50mg;99.8％ 订购|咨询

DL-蛋氨酸（甲氨酸) CAS 59-51-8 规格：HPLC≥98%;200mg 订购|咨询

10-羟基攀援山橙碱 CAS 119188-47-5 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

甲素（内酯醇） CAS  规格：20mg 订购|咨询

NCI-H226[H226]细胞，人肺癌细胞说明书Jun激活区域-连接蛋白1抗体 英文名称

：Jab1 0.1ml

磷酸化蛋白激酶JAK-2抗体 英文名称：phospho-JAK2(Tyr221) 0.1ml

蛋白激酶JAK-3抗体 英文名称：Jak3 0.1ml

磷酸化蛋白激酶JAK-3抗体 英文名称

：Phospho-Jak3 (Tyr785) 0.1ml

磷酸化蛋白激酶JAK-3抗体 英文名称
：Phospho-Jak3 (Tyr980 + Tyr981) 0.1ml

蛋白质激酶JAK2抗体 英文名称：JAK2 0.1ml

磷酸化原癌基因c-Jun抗体 英文名称：phospho-c-Jun(Thr93) 0.1ml

JWA蛋白抗体 英文名称
：JWA 0.2ml

连接蛋白JPH3抗体 英文名称
：Junchilin 3 0.2ml

连接粘附分子C抗体 英文名称：JAMC 0.2ml

蛋白质激酶JAK-1抗体 英文名称
：JAK1 0.1ml