老哥俱乐部

细胞培养方法：
1
、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）
，使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2
、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH

、温度
、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下

。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出

，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法

； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎
，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

2-甲苯;纯品型;标准品 CAS 95-49-8 规格：0.5g 订购|咨询

雌酚 CAS 53-16-7 规格：20mg 订购|咨询

伤寒门氏菌 CAS  规格：冻干粉 订购|咨询

野百合碱; 单响尾蛇蛋白; 大叶猪尿青 CAS  规格：HPLC≥99%,200mg/支 订购|咨询

丹参素钠;Sodium danshens CAS 67920-52-9 规格：20mg 订购|咨询

环黄芪醇 CAS 84605-18-5 规格
：20mg 订购|咨询

CAS  规格：50mg 订购|咨询

2-氨基-4,6-双环丙氨基三嗪 对照品 CAS  规格


：200mg 订购|咨询

奥瑞布林 CAS 181816-48-8 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

麦芽糖 CAS 69-79-4 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

CAS 69-81-8 规格
：50mg 订购|咨询

Caki-1细胞，人肾透明细胞癌皮肤转移细胞规格钙转运蛋白1抗体 英文名称：TRPV6 0.1ml

金属蛋白酶组织抑制因子-2抗体 英文名称


：TIMP-2 0.1ml

坏死因子配体超家族成员19抗体 英文名称
：TNFRSF19 0.1ml

坏死因子配体超家族成员9抗体 英文名称：TNFSF9 0.1ml

转醛醇酶抗体 英文名称
：Transaldolase 1 0.2ml

转录延伸因子B2抗体 英文名称：Elongin B 0.1ml

TATA框结合蛋白关联因子12抗体 英文名称：TAF12 0.1ml

兔抗甲状腺球蛋白 英文名称
：TG 0.1ml

坏死因子α诱导蛋白3抗体 英文名称：TNFAIP3 0.2ml

瞬时受体电位离子通道蛋白/M亚家族抗体 英文名称：TRPM2 0.2ml

抑制转移候选基因3抗体 英文名称：TSSC3 0.2ml