老哥俱乐部

下列是产品的订购信息
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细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态
、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度
、氧气
、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中

，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

五通桥毛霉 Mucor wutungkiao腊状芽胞杆菌 Bacillus cereus

香菇 Lentinula edodes苜蓿中华根瘤菌

人脐带单核细胞*培养基100mL

MCF-7(人腺细胞)5×106cells/瓶×2

BRL 3A, 大鼠肝正常细胞

大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）人淋巴上皮细胞*培养基

低分化鼻咽细胞CNE-2

半固体琼脂/半固体动力培养基/半固体营养琼脂/Semi-Solid Agar细菌动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验等250克国产/进口

α-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)重组蛋白Recombinant Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein (aHSP)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis酒假丝酵母 Candida kefyr

Tb 1 Lu细胞
，蝙蝠肺细胞规格健康皮张炭疽抗原Anthrax Paper antigen  1ml

兔抗辛抗血清Rabbit anti-digoxin whole serum 1ml

兔抗荧光素抗血清Rabbit Anti-FITC Whole serum 1ml

兔抗HRP抗血清Rabbit anti-HRP whole serum 0.5ml

兔抗人IgA抗血清Rabbit anti-human IgA whole serum 1ml

兔抗人IgG（γ-链）恒定区抗血清Rabbit anti-human IgG heavy chain constant region whole serum 0.5ml

兔抗人Kappa链抗血清（k-链抗血清）Rabbit anti-human Kappa Chain whole serum 1ml

牛血清白蛋白抗血清BSA 1ml

荧光素Cy7标记兔IgG(细胞流式同型对照)Rabbit IgG/Cy7 0.1ml

荧光素Cy7标记小鼠IgG(细胞流式同型对照)Mouse IgG/Cy7 0.1ml

荧光素Cy7标记羊IgG(细胞流式同型对照)Goat IgG/Cy7 0.1ml

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿
，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清

；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。