老哥俱乐部

细胞名称  小鼠杂交瘤细胞；4G10费用
形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 半贴壁生长

特征特性 可产生单克隆抗体。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 1
：

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C25

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

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小鼠杂交瘤细胞

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【培养指南】
小鼠杂交瘤细胞；4G10费用对于贴壁细胞
，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟
，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落
，迅速拿回操作台
，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基

，轻轻打匀后吸出
，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液
，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1
：2到1
：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起
，将细胞悬液按1
：2到1
：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行小鼠杂交瘤细胞
；4G10费用冻存。贴壁细胞冻存时
，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后
，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中
，再添加10%DMSO后进行冻存
。悬浮细胞冻存时
，应将细胞收集
，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化
：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃
，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶
，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用
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；4G10费用20支D-核糖-双岐杆菌鉴定

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小鼠杂交瘤细胞
；4G10费用细胞分类：
*种：
是冻存产品
，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不这种
，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行

，还是复苏没操作好
；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的方式
，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是老哥俱乐部复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户
，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大
，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：老哥俱乐部的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后

，由老哥俱乐部实验室扩增、冻存
，冻存的产品全部经过QC检测
，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌
、真菌、支原体污染。