老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点

：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等

。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度
、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时

，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜

、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜

、免疫组织化学

、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

细胞培养方法：
1
、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%*（T25瓶）

，使*覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2
、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基
。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%*（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒

，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

香叶醇;Geraniol CAS 106-24-1 规格：20mg 订购|咨询

霹雳萝芙木碱 CAS 4382-56-3 规格：HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

环氧续随子醇 CAS 28649-60-7 规格
：20mg 订购|咨询

牡丹皮 CAS  规格
：1g 订购|咨询

异茴芹素;Isopimpinellin( CAS 482-27-9 规格：20mg 订购|咨询

原阿片碱 CAS 130-86-9 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

百合对照药材 CAS  规格：1g 订购|咨询

右* CAS  规格
：100mg 订购|咨询

华蟾酥基 CAS 470-37-1 规格：20mg 订购|咨询

续随二萜醇 CAS  规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

科罗索酸 CAS 4547-24-4 规格
：20mg 订购|咨询

U87MG细胞
，人恶性胶质母细胞瘤细胞供应商PE-Cy3标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3 0.1ml

PE-CY5标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/PE-CY5 0.1ml

APC标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/APC 0.1ml

Alexa Fluor 350标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 0.1ml

Alexa Fluor 488标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488 0.1ml

Alexa Fluor 647标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml

Alexa Fluor 555标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 0.1ml

PE-Cy5.5标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 0.1ml

罗丹明标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/RBITC 0.1ml

FITC标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/FITC 0.3ml

碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/AP 0.1ml