老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中

，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜

、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备
。
​
培养操作步骤
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片

，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎
，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

斯皮诺素 CAS 72063-39-9 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

新绿原酸 CAS 906-33-2 规格：20mg 订购|咨询

小檗红碱;Berberrubine CAS 15401-69-1 规格：20mg 订购|咨询

染料木苷;4',5,7-三羟异黄-7- CAS 529-59-9 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

细叶远志皂苷 CAS 20183-47-5 规格：20mg 订购|咨询

二氢血根碱 CAS  规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

酸枣仁皂苷A1 CAS 194851-84-8 规格：10mg 订购|咨询

2”-O-没食子酰基金丝桃苷 CAS 53209-27-1 规格

：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

白绵马素AP CAS 59092-91-0 规格
：10mg 订购|咨询

法舒地尔 CAS  规格：50mg 订购|咨询

正十二烷酸巨大戟酯;Dodecaic CAS 54706-70-6 规格
：20mg 订购|咨询

HBL-100细胞

，人乳腺细胞供应商神经管畸形相关蛋白VANGL2抗体 英文名称
：VANGL2 0.2ml

磷酸化血管扩张刺激磷蛋白抗体 英文名称
：Phospho-VASP(Ser239) 0.1ml

磷酸化血管内皮生长因子受体2抗体 英文名称：phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059) 0.1ml

01群小川型霍乱弧菌抗体 英文名称：V.cholera Ogawa 0.2ml

囊泡相关膜蛋白1,2,3抗体 英文名称：VAMP-1+2+3 0.1ml

重组猪细小病毒VP2蛋白抗体 英文名称

：VP2 0.2ml

神经内分泌调节肽VGF抗体 英文名称：VGF/NERP2 0.1ml

血管内皮生长因子D型抗体 英文名称
：VEGF-D 0.1ml

L-型电压依赖型钙通道α抗体 英文名称：VDCC-L alpha 0.1ml

磷酸化核苷酸交换因子VAV3抗体 英文名称：phospho-VAV3(Tyr141) 0.1ml

囊泡相关膜蛋白相关蛋白A抗体 英文名称：VAPA 0.2ml

细胞培养方法：
1

、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿

，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2


、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基
。
3、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后

，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。