老哥俱乐部

细胞培养方法
：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2
、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中

，补加适量培养基

。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息

：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎
，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

Toll样受体6(TLR6)重组蛋白Recombinant Toll Like Receptor 6 (TLR6)

酸链球菌 Lactococcus lactis希尔正青霉 Eupenicillium shearii

人慢性骨髓性白血病细胞K562

速激肽受体1(TACR1)重组蛋白Recombinant Tachykinin Receptor 1 (TACR1)

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumQBC-939, 人胆管细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHep 3B(人肝细胞)

人肺上皮细胞中国仓鼠卵巢细胞亚株

月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤/LST肉汤/LST Broth各种食品中大肠菌群最近似值(MPN)测定250克国产/进口

牛津琼脂基础 规格： 100g 用途： 用于单核增生李斯特氏菌的选择性分离(SN0184-2005)。

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactisInclusion body Denature Reagent/包涵体蛋白溶解液

TE-13(人食管细胞)人肾上腺神经母细胞瘤（脑转移）

CRL-1548细胞
，大鼠肝癌细胞说明书大鼠UK ELISA Kit 96T

人血管内皮细胞粘附分子1VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit 96T

小鼠乙型肝炎核心抗体HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 96T

小鼠乙型肝炎e抗体HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 96T

大鼠ⅫF XII ELISA Kit 96T

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4TRAIL-R4(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4) ELISA Kit 96T

人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 96T

小鼠乙型肝炎e抗原HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen) ELISA Kit 96T

大鼠ⅩⅢF X III ELISA Kit 96T

大鼠ⅢF III ELISA Kit 96T

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3) ELISA Kit 96T