老哥俱乐部

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）
，使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中

。
2
、细胞复苏

：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀

。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基。
3
、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等
。
2.研究条件可以人为控制
pH

、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理

、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜
、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出

，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出


，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法

； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理


； 
3．盖玻片非常薄

，易碎
，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞

，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

特女贞苷 CAS 111926-2011 规格：20mg 订购|咨询

皂苷 A ;Clidiside CAS 916347-31-4 规格：20mg 订购|咨询

L- CAS 56-89-3 规格：20mg 订购|咨询

酸长春新碱 CAS  规格
：HPLC≥98%，20mg/支 订购|咨询

重楼皂苷 Ⅵ CAS 76296-75-8 规格
：20mg 订购|咨询

乙羧草;纯品型;标准品;有证书 CAS 77501-60-1 规格
：0.25g 订购|咨询

染料木苷 CAS 529-59-9 规格：20mg 订购|咨询

素 CAS 63968-64-9 规格：UV≥99%

，20mg/vial 订购|咨询

5-羟色胺酸; 5-羟基 CAS 56-69-9; 4350-09-8 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

除线磷;纯品型;标准品;有证书 CAS 97-17-6 规格：0.1g 订购|咨询

野菊花内酯 CAS  规格：10mg 订购|咨询

H125细胞，人肺癌细胞规格雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体 英文名称：RICTOR 0.2ml

核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 英文名称：RelB 0.2ml

细胞周期检控Rad17蛋白抗体（复制因子C） 英文名称：Rad17 0.1ml

磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体 英文名称：Phospho-Rad17 (Ser645) 0.1ml

受体结合激酶2抗体 英文名称
：RIP2 0.2ml

/激酶p90RSK蛋白抗体 英文名称：p90RSK 0.1ml

磷酸化受体结合激酶2抗体 英文名称：Phospho-RIP2 (Ser176) 0.1ml

染色体浓缩调控蛋白1抗体 英文名称：RCC1 0.2ml

磷酸化染色体浓缩调控蛋白1抗体 英文名称：Phospho-RCC1 (Ser11) 0.1ml

S6核糖体蛋白抗体 英文名称：RPS6 0.1ml

核糖体S6蛋白激酶抗体 英文名称：RPS6KB1 0.1ml