老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存
，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染

，吸取终止液和底物A、B液时

，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品


。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感

，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒
。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样
。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

产品名称
：家蚕卵黄蛋白(LT) ELISA检测试剂盒
英文名称：Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit
产品货号
：EY-E96871
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液
，组织匀浆,心房水标本等等。 
​
样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管

。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA
、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒

。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻

。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

FN纤粘连蛋白(来源人血) 0.2mg/ml  支

伊红染液 500ml  瓶

Bost aurusdomesticus 牛胆粉 100g  瓶

Nonidet P- 40 Substitute NP-40 100ml  瓶

兔抗小鼠IgG（免疫血清） 0.5ml  支

nnnnnne L-(蛋氨酸) 25g  瓶

Doxycycline 564-25-0  20mg

彩虹245广谱蛋白Marker（11-245KD）20T 100ul  支

Pfu DNA Polymerase 1000U  支

MEM-EBSS 500ml  瓶

Maltohexaose 麦芽六糖 34620-77-4  10mg

柠檬酸钠缓冲液0.01mol-L， pH6.0 2L  袋

家蚕卵黄蛋白(LT) ELISA检测试剂盒甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 SULT2B1 ELISA配对抗体

人 TIMM21 基因全长ORF克隆

人 CBY1 基因全长ORF克隆

人 INPP5J 基因全长ORF克隆

人 CA7 基因全长ORF克隆

人 MSMB 转录变体PSP94 基因全长ORF克隆

人 TMPRSS11E 基因全长ORF克隆

小鼠 SLAMF6 / Ly108 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 EPHA7 / EHK3 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

甲型流感 H7N7 (Netherlands/219/2003) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)(表达载体), 无标签

人 TLR6 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

ELISA 试验时
，注意事项如下
： 
     1. 正式试验时
，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体
，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板
、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被

，在同一实验条件下进行反应
，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应
，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。