老哥俱乐部

细胞培养方法
：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落

，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基。
3
、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构

、生命活动等
。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时

，可以施加化学
、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜、电子显微镜
、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤

：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中

； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎

，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

桔梗皂苷D CAS  规格
：约20mg 订购|咨询

CAS  规格：20mg 订购|咨询

田基黄苷 CAS 22007-72-3 规格：20mg 订购|咨询

柴胡皂苷C CAS 20736-08-7 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

茶多酚（UV98%） CAS 84650-60-2 规格：20mg 订购|咨询

乙酰车前草酸甲酯 CAS  规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

朝藿定A1;Epimedin A1 CAS 140147-77-9 规格：20mg 订购|咨询

乙素 CAS 38647-10-8 规格：20mg 订购|咨询

浙贝母 CAS  规格：1g 订购|咨询

加 CAS 17902-23-7 规格：50mg 订购|咨询

辅酶Q10 CAS 303-98-0 规格：20mg 订购|咨询

B16细胞


，小鼠黑色素瘤细胞规格IQSEC2抗体 英文名称
：IQSEC2 0.1ml

交叉蛋白2抗体 英文名称

：Intersectin 2 0.1ml

三磷酸焦磷酸酶抗体 英文名称：Inosine triphosphate pyrophosphatase 0.2ml

吲哚胺2,3-双加氧酶抗体 英文名称
：IDO 0.2ml

白细胞介素19抗体 英文名称：IL-19 0.2ml

胰岛素基因增强结合蛋白1/2抗体 英文名称
：Islet-1+2 0.2ml

抑制素A/Inhibin α抗体 英文名称：Inhibin Alpha 0.2ml

磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体 英文名称
：Phospho-IRAK1 (Ser376) 0.1ml

磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体 英文名称：Phospho-IRAK1 (Thr209) 0.1ml

磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体 英文名称
：Phospho-IRAK1 (Thr387) 0.1ml

干扰素调节因子3 英文名称
：IRF3 0.1ml