老哥俱乐部

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基

；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3
、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控

、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时
，可以施加化学、物理

、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜
、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻

； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

藁本内酯 CAS 4431-01-0 规格：20mg 订购|咨询

鸭脚树叶碱;2α,5α-Epoxy-1, CAS 4684-32-6 规格：20mg 订购|咨询

β-蒎烯;beta-Pinene CAS 127-91-3 规格：20mg 订购|咨询

格列风内酯 CAS 61371-55-9 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

圣草酚 CAS 552-58-9 规格

：20mg 订购|咨询

D（－）阿拉伯糖 CAS  规格：30mg 订购|咨询

刺芒柄花素 CAS 485-72-3 规格：20mg 订购|咨询

吴茱萸次碱 CAS 84-26-4 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 CAS 23313-21-5 规格：HPLC≥98%，20mg/vial 订购|咨询

柚皮苷 CAS 10236-47-2 规格
：20mg 订购|咨询

车叶草苷;Asperuloside CAS 14259-45-1 规格

：20mg 订购|咨询

B95-8细胞
，EBV 转化的绒猴白细胞价格鸟苷酸调节蛋白12抗体 英文名称：G protein alpha 12 0.1ml

磷酸化胶质纤维酸性蛋白抗体 英文名称
：phospho-GFAP (Ser8) 0.1ml

磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体 英文名称：phospho-GABBR2 (Ser783) 0.1ml

磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体 英文名称：phospho-GABBR2 (Ser892)  0.1ml

生长分化因子10抗体（TGF-β超家族10） 英文名称：GDF10 0.1ml

细胞生长抑制蛋白34 英文名称：GIG34 0.1ml

G蛋白偶联受体LOC51210蛋白抗体 英文名称
：GPCR LOC51210 0.2ml

生长激素抗体 英文名称：Growth Hormone 0.1ml

GDP甘露糖焦磷酸化酶抗体 英文名称
：GMPPA 0.2ml

G蛋白偶联受体171抗体 英文名称
：GPR171 0.2ml

神经细胞膜糖蛋白M6b 英文名称
：GPM6B 0.2ml