老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况

，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度

、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件
，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下
。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化

。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测

。 
实验要点及说明

：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

柴胡皂苷B1;Saikosaponin CAS 58558-08-0 规格：20mg 订购|咨询

染料木苷 CAS 529-59-9 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

粘委陵菜 CAS  规格

：1g 订购|咨询

3-O-啡酰奎宁酸;3-O-caffe CAS 327-97-9 规格
：20mg 订购|咨询

山柰酚-3-O-芸香糖苷 CAS 17650-84-9 规格：10mg 订购|咨询

熊果酸;乌苏酸;乌索酸 CAS 77-52-1 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

异七叶皂苷Ib;Isoescin Ib CAS 219944-46-4 规格：10mg 订购|咨询

杂质A CAS  规格：30mg 订购|咨询

秦皮素;Fraxetin CAS 574-84-5 规格：20mg 订购|咨询

伪金丝桃素 CAS 55954-61-5 规格：BR，98%

，剧品;20mg 订购|咨询

乙酰蝙蝠葛苏林碱 CAS  规格

：HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

TALL-104细胞，急性T淋巴细胞白血病细胞供应商辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgGRabbit Anti-Bov IgG/HRP 0.1ml

辣根过氧化物酶标记的羊抗牛IgGGoat Anti-Bovine IgG/HRP 0.1ml

辣根过氧化物酶标记的兔抗抗体IgGRabbit Anti-Biotin/HRP 0.1ml

FITC标记的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/FITC 0.3ml

FITC标记的兔抗牛IgGRabbit Anti-Bov IgG/FITC 0.3ml

PE标记的羊抗牛IgGGoat Anti-Bovine IgG/PE 0.1ml

罗丹明标记的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/RBITC 0.3ml

PE标记的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/PE 0.1ml

Alexa Fluor 647标记的兔抗牛IgGRabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml

PE-Cy5.5标记的兔抗牛IgGRabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 0.1ml

PE-Cy5.5标记的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy5.5 0.1ml

细胞培养方法
：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2
、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3
、细胞冻存
：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞

，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。