老哥俱乐部

细胞培养方法：
1
、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶）
，使覆盖整个瓶或皿
，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止


；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点
：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中

，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等
。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳

、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后

，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。

培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理

； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率
； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖 CAS 14937-32-7 规格：HPLC≥99%;20mg 订购|咨询

β-胡萝卜素 CAS 7235-40-7 规格
：20mg 订购|咨询

化钠琼脂对照培养基 CAS  规格：33.3g/300ml 订购|咨询

;Sodium Aescina CAS 20977-05-3 规格：100mg 订购|咨询

塔拉萨敏 CAS 20501-56-8 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

石斛碱;Dendrobine CAS 2115-91-5 规格
：20mg 订购|咨询

药根碱 CAS 6681-15-8 规格：20mg 订购|咨询

姜;Zingerone CAS 122-48-5 规格：20mg 订购|咨询

15-羟基松香酸 CAS  规格：HPLC≥98%;5mg 订购|咨询

络塞琳 CAS 84954-93-8 规格
：10mg 订购|咨询

林泽兰内酯D CAS  规格
：HPLC≥98%，10mg/支; 订购|咨询

Hep G2细胞，肝癌细胞供应商膜突蛋白抗体 英文名称：Moesin 0.1ml

麻疹病毒融合蛋白抗体 英文名称
：Measles virus fusion protein 0.2ml

红细胞膜蛋白55抗体 英文名称：MPP1 0.2ml

膜相关环指蛋白5抗体 英文名称：42068 0.2ml

磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 英文名称：phospho-MEF2C(Ser387) 0.1ml

磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 英文名称
：phospho-MEF2C(Thr20) 0.1ml

线粒体核糖体蛋白MRP63抗体 英文名称
：MRP63 0.1ml

基质金属蛋白酶13抗体 英文名称：MMP13 0.1ml

单氧化酶微管相关蛋白MICAL抗体 英文名称：MICAL1 0.1ml

梅克尔-格鲁伯综合征相关蛋白抗体 英文名称
：MKS1 0.2ml

突变的黑色素瘤相关抗原1抗体 英文名称：MUM1 0.2ml