老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存

，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水

。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称：封闭蛋白5ELISA检测试剂盒
英文名称
：Claudin-5
产品货号：EY-E99124
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃

，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格
：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管

。收集血液后
，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟
，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

牛α乳清蛋白(α-La)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

牛C反应蛋白(CRP)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊胰岛素（Insulin）ELISA 试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊血管内皮细胞生长因子（VEGF）ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊褪黑素（MT/MLT）ELISA 试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊瘦素（leptin）ELISA 试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊生长激素(GH)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊雌二醇(E2)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊表皮生长因子（EGF）ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊白介素6(IL-6)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

绵羊白介素2(IL-2)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

封闭蛋白5ELISA检测试剂盒小鼠颈上皮细胞培养试剂盒小鼠颈上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠平滑肌细胞培养试剂盒小鼠平滑肌细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠卵巢上皮细胞培养试剂盒小鼠卵巢上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠成纤维细胞培养试剂盒小鼠成纤维细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒小鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠卵巢成纤维细胞培养试剂盒小鼠卵巢成纤维细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠内膜上皮细胞培养试剂盒小鼠内膜上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒小鼠淋巴成纤维细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠上皮细胞培养试剂盒小鼠上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠胰腺上皮细胞培养试剂盒小鼠胰腺上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠甲状腺上皮细胞培养试剂盒小鼠甲状腺上皮细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠胰岛细胞培养试剂盒小鼠胰岛细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠肠巨噬细胞培养试剂盒小鼠肠巨噬细胞培养试剂盒试剂盒

小鼠淋巴管内皮细胞培养试剂盒小鼠淋巴管内皮细胞培养试剂盒试剂盒

ELISA 试验时，注意事项如下
： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件

，待检样品应作一式二份

，以保证实验结果的准确性
。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好

。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间

。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定

：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值
。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体

。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。