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      抗M3D受体抗体ELISA检测试剂盒

      产品名称:抗M3D受体抗体ELISA检测试剂盒

      产品特点:抗M3D受体抗体ELISA检测试剂盒相关名称 :大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

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      产品型号:48T/96T

      更新日期:2021-04-20

      访问次数 :894

      48T/96T抗M3D受体抗体ELISA检测试剂盒的详细资料:

      产品名称:M3D受体抗体ELISA检测试剂盒
      英文名称:Anti-M3 Muscarinic Receptor antibody
      产品货号 :EY-E98170
      产品规格:48T/96T
      产品保存:2-8℃,有效期6个月
      主要组成成分 :试剂 
          性状:液体 
          产品规格:96T/48T 
          96T指可以做94个标本 ,2个标准对照 
          48T指可以做47个标本,1个标准对照 
          96T-84个样本 
          48T-42个样本 
          待检样本 :体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液 ,组织匀浆,心房水标本等等。 

      样品收集、处理及保存方法
      1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管 。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离 。
      2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐 、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒 。
      3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物 。
      4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
      5)保存------如果样品不立即使用 ,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血 。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤 。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
      注意事项
      1)试剂应按标签说明书储存 ,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
      2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
      3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用  。保质前使用。
      4)使用一次性的吸头以免交叉污染 ,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
      5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
      6)洗涤酶标板时应充分拍干 ,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
      7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下 。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
      8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
      9)按照说明书中标明的时间 、加液的量及顺序进行温育操作。

      大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

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      ELISA 试验时,注意事项如下 : 
           1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份 ,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
           2. 在ELISA中 ,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括: 
           (1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体 ,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应 ,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。 
           (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间 。吸附温度 ,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定 :即用不同的蛋白质浓度(0.1 、1.0和10μg/ml等)进行包被后 ,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值 。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度 。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。 
           (3) 酶标记抗体工作浓度的选择 :首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份) 。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
           (4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉 、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护 。有条件者应使用不致癌 、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体 。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应 。通常底物作用时间 ,以10-30分钟为宜 。底物使用液必须新鲜配制 ,尤其是H2O2在临用前加入  。

       

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