老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）


； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息
：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构

、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气

、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学

、物理

、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养

，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎
，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿
，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基
。
3
、细胞冻存
：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

福美双;纯品型;标准品;有证书 CAS 137-26-8 规格：0.25g 订购|咨询

芳樟醇 CAS 78-70-6 规格：20mg 订购|咨询

紫堇灵 CAS  规格：20mg 订购|咨询

龙胆苦苷 CAS 20831-76-9 规格

：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

7-羟基香; 伞形花内酯; 伞形 CAS 93-35-6 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

洋川芎内酯A CAS 62006-39-7 规格：20mg 订购|咨询

王不留行黄苷 CAS 53452-16-7 规格：20mg 订购|咨询

;左旋四氢巴马汀;左旋延胡索乙素 CAS 10097-84-4 规格：HPLC≥99%,20mg/支 订购|咨询

油酸 CAS 112-80-1 规格：鉴别;0.1ml 订购|咨询

小白菊内酯 CAS 20554-84-1 规格：HPLC≥98%；20mg/vial 订购|咨询

CAS  规格

：50mg 订购|咨询

MEF-7/Adr细胞，乳腺腺癌耐药株价格磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α1抗体 英文名称

：Liprin alpha 1 0.2ml

线粒体离子肽酶1抗体 英文名称：LONP1 0.2ml

微管相关蛋白轻链3C抗体 英文名称
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假定抑制拉链蛋白1抗体 英文名称

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酸脱氢酶LDH-C（/睾抗原32）抗体 英文名称
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淋巴细胞特异性转运蛋白1抗体 英文名称：LST1 0.2ml

抑制基因LUCA15抗体 英文名称：LUCA15 0.2ml

RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体 英文名称
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磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体 英文名称：Phospho-LRP6(Thr1479) 0.1ml

磷酸化淋巴细胞特异性蛋白激酶抗体 英文名称

：phospho-LCK(Tyr394) 0.1ml

低密度脂蛋白受体相关蛋白5抗体 英文名称
：LRP5 0.1ml