老哥俱乐部

细胞培养方法：
1
、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后

，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中

，补加适量培养基
。
3、细胞冻存
：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞

，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中

，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH


、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
培养操作步骤
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

8-乙氧基滇乌碱 ;8-O-ethyly CAS 70578-24-4 规格：20mg 订购|咨询

甲基正壬 CAS 112-12-9 规格：HPLC≥95%;0.1ml 订购|咨询

番泻苷C CAS 37271-16-2 规格：HPLC≥98%
，20mg/vial 订购|咨询

普鲁卡因 CAS 18756 规格
：100mg 订购|咨询

石杉碱乙;Huperzine B CAS 103548-82-9 规格：20mg 订购|咨询

烯唑醇;纯品型;标准品;有证书 CAS 76714-88-0 规格：0.1g 订购|咨询

阿利坦酯杂质B CAS  规格：20mg 订购|咨询

大叶茜草素;Rubimaillin CAS 55481-88-4 规格

：20mg 订购|咨询

基苯酞 CAS 551-08-6 规格
：20mg 订购|咨询

桃叶珊瑚苷 CAS 479-98-1 规格
：20mg 订购|咨询

愈创甘油 CAS  规格：100mg 订购|咨询

L1210细胞，小鼠白血病细胞规格外周髓鞘蛋白-22多肽PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 0.5mg

磷脂酰肌醇激酶（抗原）PI3K 0.5mg

骨形态发生蛋白4（抗原）BMP4(bone morphogenetic protein 4) 0.5mg

小鼠胎盘生长因子（多肽抗原）PLGF (Placenta growth factor) 0.5mg

胎盘生长因子（多肽抗原）PLGF (Placenta growth factor) 0.5mg

蛋白磷酸酯酶-1（抗原）PP-1 0.5mg

人胎盘生长因子（多肽抗原）PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 0.5mg

骨成型蛋白受体1A抗原BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 0.5mg

D型-过氧化酶活化增生受体(多肽）PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) 0.5mg

蛋白质磷酸酶-2A（抗原）PP-2A (protein phosphatase 2A) 0.5mg

B细胞特异性转录因子抗原BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) 0.5mg