產品名稱 :大鼠輸卵管平滑肌細胞
產品特點:大鼠輸卵管平滑肌細胞公司正在出售的產品非洲綠猴腎細胞;VERO HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 IL5 Others Mouse 小鼠 IL5 杆狀病毒-昆蟲細胞裂解液 EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish)
產品型號 :
更新日期 :2024-12-19
訪問次數 :511
大鼠輸卵管平滑肌細胞的詳細資料 :
細胞簡介 :
輸卵管是卵子運輸 、儲存 、獲能 ,以及卵母細胞采取 、運送 、成熟 、受精和早期胚胎發育的重要場所 。輸卵管與其他空腔器官相似 ,其管壁由內向外為粘膜層 (tunica mucosa) 、肌層(muscular layer)和漿膜層所構成 。其中 ,肌層的結構和厚度因不同節段而有差異 ,峽部肌層厚 ,管腔亦小 。
產品名稱 | 大鼠輸卵管平滑肌細胞 | 組織來源 | 輸卵管組織 |
英文名稱 | Rat oviduct smooth muscle cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞特性
:
1)組織來源於實驗動物的正常輸卵管組織 。
2)細胞鑒定 :平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性 。
3)經鑒定細胞純度高於90% 。
4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。
5)細胞生長方式 :梭形細胞 ,不規則細胞 ,貼壁培養 。
推薦培養基
:
老哥俱樂部推薦使用 Delf 原代平滑肌 細胞 培養體係 作為體外培養的培養基 。
實驗報告
:
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
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:
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注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
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