細胞簡介 ：

心髒壁主要由心肌構成 ，心房壁比心室壁薄 。心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌 。心肌細胞為短柱狀 ，一般隻有一個細胞核 ，心肌細胞之間有閏盤結構 。心房與心室的心肌層不直接相連 ，它們分別起止於心房和心室交界處的纖維支架 ，形成各自獨立的肌性壁 ，從而保證心房和心室各自進行獨立的收縮舒張 ，以推動血液在心髒內的定向流動 。

臨床研究表明 ，在房顫患者心房肌細胞內 ，發現存在有異常增高的細胞內鈣蓄積 ，並證實心肌細胞內鈣超載在心律失常的發生中起著關鍵作用 。此外 ，在房顫患者心房細胞內也發現有CaMK Ⅱ的異常高表達 。

細胞特性 ：

1） 組織來源於實驗動物的正常心髒組織 。 本細胞為終末分化細胞 ，增殖能力很弱 ，建議客戶收到細胞後直接用於後續實驗 ，不要進行擴增培養 。

2) 細胞鑒定 ：肌球蛋白重鏈(Myosin heavy chain)熒光染色為陽性 。

3) 細胞純度 ：經鑒定細胞純度高於90%。

4) 不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5) 細胞生長方式 ：柱狀細胞 ，不規則細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 delf原代心肌細胞培養體係 作為該細胞的體外培養試劑。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠白三烯B4(LTB4)檢測試劑盒  ，英文名 ： LTB4 ELISA Kit

Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)檢測試劑盒

ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)  進口分裝

CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素

通用型非蛋白/遊離巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitADP大鼠脂聯素

CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein

CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)

IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白

脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白

CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein

小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒

Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1檢測試劑盒人抗肝細胞胞質1型抗體(LC1)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物內質網粗提分離試劑盒10次

Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠心房心肌細胞小鼠白介素23(IL-23)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素2(IL-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。