老哥俱乐部

细胞简介：

肌源干细胞存在于骨骼肌中
，是肌卫星细胞的前体细胞
，有很强的自我更新能力和多分化潜能。已有研究表明，体外培养回植体内明显增加肌组织的再生能力，且存活率高于卫星细胞

。

由于肌肉组织取材容易
、易被转染、移植后易存活等贴点，应用于再生医学研究中，压力性尿失禁
、肌营养等。

细胞特性
：

1）组织来源于术后的人肌肉组织。

2)细胞鉴定：Sca-1荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV
、HCV
、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式：梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 delf原代 间充质干 细胞培养体系 作为该细胞的培养基
。

实验报告：

一
、分离与培养：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养

；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2

、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次

，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠钙结合蛋白(CALB)检测试剂盒 
，英文名： CALB ELISA Kit

Rat beta 2 glycoprotein 1 aibody IgA/G/M (beta 2-GP1 IgA/G 大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G

RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforDP(Humandeoxyuridineiphate)ELISAKit人脱氧尿三0酸

细胞培养液低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)检测试剂盒

CD200R1重组小鼠 CD200R1 / OX-2R 蛋白 (His 标签) Protein

BAFF/CD257(B cell activating factor 0.5mgBAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B细胞激活因子抗原

GM2A重组人 GM2A 蛋白 (His 标签) Protein

ACP1 Protein Human 重组人 ACP1 / LMW-PTP 蛋白 (GST 标签)

CD36 Protein Rat 重组大鼠 CD36 / SCARB3 蛋白

BAFF/CD257(B cell activating factor 0.5mgBAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B细胞激活因子抗原

ACP1 Protein Human 重组人 ACP1 / LMW-PTP 蛋白 (GST 标签)

CD200R1重组小鼠 CD200R1 / OX-2R 蛋白 (His 标签) Protein

CD36 Protein Rat 重组大鼠 CD36 / SCARB3 蛋白

GM2A重组人 GM2A 蛋白 (His 标签) Protein

植物果胶酶(Pectinase) 检测试剂盒

Human ai nucleosome aibody IgG (AnuA-IgG) ELISA Kit 人抗核小体抗体IgG(AnuA-IgG)检测试剂盒

PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 猪载脂蛋白B100(apo-B100)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAECAELISAKit大鼠抗内皮细胞抗体

血液氧化型(GSSG)浓度荧光定量检测试剂盒50次

MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)检测试剂盒

人肌源干细胞蔗糖合成酶（SS)测试盒   可见分光光度法   50管/48样

蔗糖0酸合成酶（SPS)测试盒   可见分光光度法   50管/48样

酸性转化酶（AI）测试盒   可见分光光度法   50管/24样

转化酶（NI）测试盒   可见分光光度法   50管/24样

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面

，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因

，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞


，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。