老哥俱乐部

下列是产品的订购信息
：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等

。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度
、氧气
、二氧化碳、张力等物理化学的条件
，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中


； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

MCF7/腺细胞株国产

热带假丝酵母 Candida tropicalis赭曲霉 Aspergillus ochraceus

K-562(人慢性骨髓性白血病细胞)5×106cells/瓶×2

迪庆绵羊皮肤成纤维样细胞根瘤菌 Rhizobium sp.

DNA酶甲基绿琼脂基础/脱氧核糖核酸酶甲基绿琼脂基础/Dnase Agar Base With Methyl Green用于细菌的DNA酶水解试验100克国产/进口

无菌豚鼠血清/Sterile Defidrinated Guinea pig BloodBR200毫升国产/进口

B16-F1(小鼠黑色素瘤细胞)运动发酵单胞菌 Zymomonas mobilis

抗生素Ⅰ号培养基(PH7.8-8.0)/抗生素1号培养基(PH7.8-8.0)/检定培养基/Antibiotic Agar 
、

、、、
、、等药品效价测定250克国产/进口

玉蜀黍赤霉 Gibberella zeaePC-3M(人前列腺细胞)

NCI-H157(人非小细胞肺腺细胞)嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

INS-1细胞，大鼠胰岛素细胞供应商人可溶性凋亡相关因子配体sFASL(Human soluble Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 96T

植物维生素B6Plant Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 96T

兔基质金属蛋白酶1MMP-1 (Rabbit matrix metalloproteinase 1) ELISA Kit 96T

小鼠骨成型蛋白2BMP-2(Mouse Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 96T

大鼠热休克蛋白47HSP47 ELISA Kit 96T

小鼠骨成型蛋白4BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) ELISA Kit 96T

人细胞凋亡抑制因子IAP(Human inhibitor of apoptosis) ELISA Kit 96T

植物25羟基3Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit  96T

兔8-异构前列腺素8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit 96T

大鼠内源性糖皮质激素GC ELISA Kit 96T

大鼠柠檬酸合酶CS ELISA Kit 96T

细胞培养方法：
1

、细胞传代

：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）
，使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后

，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基

；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右

，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存

：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次

，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。