老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠表皮干细胞

英文名称
：Mouse primary representative skin stem cells

组织来源：皮肤组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

角质形成细胞在基底层有一亚群，即表皮干细胞，它通过对称或不对称分裂产生短暂扩增细胞
，短暂扩增细胞经过几代扩增后便成为终末分化的表皮角质细胞。表皮是一个可以持续自我更新的组织
，因此表皮干细胞具有足够的增殖潜力
，表皮干细胞不仅在体内平衡和创伤修复中其关键作用，而且是肿瘤发生和基因的主要靶标。

细胞特性
：

1）组织来源于实验动物的正常皮肤组织。

2)细胞鉴定：p63与细胞角蛋白-14（CK-14）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：铺路石状细胞
，不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 DELF原代 角质形成 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液

、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)elisa检测试剂盒

鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)elisa检测试剂盒

冰冻切片组织TUBULIN蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

小鼠白蛋白(albumin)elisa检测试剂盒

仓鼠丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒

/酵母a-（a-AMYLASE）活性CNPG3比色法定量检测试剂盒

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa检测试剂盒

大鼠多药耐药蛋白1(ABCB1)elisa检测试剂盒

血清总铁结合能力测试盒

组蛋白H3样抗体 Centromeric histone H3-like protein-2

12号染色体开放阅读框42抗体 C12ORF42

黑色素瘤生长刺激活性蛋白α/GROa抗体 GRO Alpha

环指蛋白165抗体 RNF165

PDZ结构域PDZK3蛋白抗体 PDZD3

PerCP标记的标记的精酶1抗体 Arginase 1, PerCP conjugated

神经细胞增殖和分化调控蛋白1抗体 NPDC1

生长抑制蛋白NDN抗体 Necdin

eIF2Bγ单克隆抗体 EIF2B3

FAM125A蛋白抗体 FAM125A

磷酸化丝/苏蛋白激酶MAK抗体 phospho-MAK (Tyr159)

磷酸化血管内皮生长因子受体2抗体 phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)

穿膜蛋白DLK1抗体 DLK1

单丝蛋白激酶1抗体 LIMK1

锌指蛋白28抗体 ZFP28

锌指蛋白AN1-D3抗体 ZFAND3

饲料（folic acid）含量微生物比色法定量检测试剂盒

大鼠波形蛋白(VIM)elisa生化检测试剂盒

VIM ELISA Kit

小鼠表皮干细胞KLK7ELISAKit

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的

，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用

，非食用