老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存

，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A
、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样
。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称

：热休克蛋白90βELISA检测试剂盒
英文名称：Heat Shock Protein 90β
产品货号：EY-E98298
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本
：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后
，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤

。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

RM-1(小鼠前列腺细胞)5×106cells/瓶×2

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium melilotiLLC(小鼠肺细胞)

浅红酵母 Rhodotorula pallidaBNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞)

小鼠黑色素瘤细胞B16

铅色青霉 Penicillium lividum葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

胶原酶(含100mL酶解缓冲液)大鼠肝动脉平滑肌细胞*培养基

NZYM琼脂/NZYM AgarBR100克国产/进口

髂动脉内皮细胞*培养基纯白链霉菌 Streptomyces candidus

COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)5×106cells/瓶×2

葡枝根霉 Rhizopus stoloniferOne StepWestern Kit AP(Rabbit)/一步法快速WB(AP)试剂盒(兔)

草菇 Volvariella bombycina异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala

热休克蛋白90βELISA检测试剂盒鸡和肽素(CPP)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡III型胶原α1(COL3α1)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡胱天蛋白酶14(CASP14)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡受磷蛋白(PLN)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡葡萄糖激酶(GCK)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡前列腺素F(PGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡表皮调节素(EREG)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡成纤维细胞生长因子7(FGF7/KGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

鸡嗜酸粒细胞趋化因子(ECF/CCL11)酶联免疫吸附测定试剂盒

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应
，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等
。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板

。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好

。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度

。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全
、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用
，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体
。底物作用一段时间后

，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。