老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存
。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用
。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水

。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感
，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒
。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称
：DFGFELISA检测试剂盒
英文名称

：DFGF
产品货号
：EY-E98718
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格
：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清
，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等
。 

样品收集

、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激
。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测

。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎
。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

LAP18/Stathmin  白病相关蛋白18/蛋白18抗体 规格: 0.1ml*

DCTN3  动力蛋白激活蛋白亚基3抗体 规格: 0.2ml*

Rabbit Anti-human sIgA/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 0.1ml*

HGF  肝细胞生因子抗体 规格: 0.1ml*

CIKS  核因子NFκB激活蛋白1抗体 规格: 0.2ml*

phospho-CSF1R (Tyr723)  磷酸化巨噬细胞集落激因子受体抗体 规格: 0.1ml*

phospho-RPS6KA1(Ser352)  磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗体 规格: 0.1ml*

ADRB1  上素能受体β1抗体 规格: 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/PE  PE标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1ml*

Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端) 规格: 0.1mlCystatin C/CST3  胱抑素C/半蛋白酶抑制剂C抗体 规格: 0.2ml*

Mouse Anti-human IgG(3D3)  鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 1mgS100B  S100B蛋白抗体 规格: 0.1ml*

PI3 Kinase p110 delta  磷脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 规格: 0.1mlKLK15  15抗体 规格: 0.2ml*

Salmonella typhimurium O  伤寒沙门氏菌体蛋白O抗原抗体 规格: 0.2mlphospho-β catenin(Tyr142)  磷酸化β 连环素蛋白抗体 规格: 0.1ml*

MTCH1  细胞增诱导蛋白60（早老素相关蛋白） 规格: 0.2mlPhospho-CEBP beta (Thr235)  磷酸化转录调节因子CEBP β抗体 规格: 0.1ml*

TLR9/CD289  Toll样受体9抗体 规格: 0.1mlFAAH1  脂肪酸酰胺解酶1抗体 规格: 0.2ml*

DFGFELISA检测试剂盒含225ml磷酸盐缓冲液均质袋 10个/包 用于菌落总数
，大肠菌群，金葡菌
，大肠杆菌样品制备

含90ml磷酸盐缓冲液均质袋 10个/包 用于菌落总数，大肠菌群
，金葡菌，大肠杆菌样品制备

含225ml 缓冲蛋白胨（BPW）均质袋 10个/包 用于沙门氏菌、阪崎杆菌制样和前增菌培养

含900ml缓冲蛋白胨（BPW）均质袋 900ml/袋*2 用于阪崎杆菌的定量

含90ml 缓冲蛋白胨（BPW）均质袋 90ml/袋*10 用于阪崎杆菌的定量

含100ml 缓冲蛋白胨（BPW）均质袋 90ml/袋*10 用于阪崎杆菌的定量

含225ml 3%碱性蛋白胨均质袋 10个/包 用于副溶血性弧菌的前增菌培养

含225ml mEC+n肉汤均质袋 10个/包 用于大肠杆菌O157菌前增菌培养

新生霉素 4.5mg/支*5 每支添加于225ml改良EC（MEC+n）肉汤或mEC肉汤或mTSB肉汤中

含225ml LB1肉汤均质袋 10个/包 用于李斯特氏菌制样和前增菌培养（GB 标准）

萘酮酸（5.0mg） 5.0mg/支*5 添加于225ml

吖黄素（3.0mg） 3.0mg/支*5 每支添加于225ml

含225ml FB1增菌液均质袋 10个/包 用于李氏菌前增菌培养（SN 标准）

FB1(Half-Fraser)添加剂(A、B) 2ml/支*40 A

、B各取一支添加于225mlFraser培养基或Half-Fraser培养基中

ELISA 试验时
，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择
：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板

。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度
。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择
：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应
，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应
。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入 
。