老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A
、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒

。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称：菜豆凝集素(PHA)ELISA检测试剂盒
英文名称：Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA Kit
产品货号

：EY-E96885
产品规格
：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状

：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本
：体液
，血清
，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等
。 
​
样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后
，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎
。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

盐酸赛庚
：323.86Cyproheptadine hydrochloride：41354-29-4 C21H22ClN

三氟甲磺酸铜：361.67三氟甲磺酸铜
：34946-82-2 C2CuF6O6S2

溶剂橙2Solvent Orange 2：262.31 C17H14N2O：2646-17-5

2-硝-4-三氟甲氟
：209.12- nitro -4- three fluorine fluorotoluene
：367-86-2 C7H3F4NO2

表白桦脂Betulinic acid.
：：38736-77-5

铝粉/铝片：26.98Aluminium powder：7429-90-5- Al

N-丁咪唑：124.18N- butyl：4316-42-1 C7H12N2

1,3,5-三氟-2,4,6-三：509.771,3,5- three -2,4,6- three iodine fluoride
：84322-56-5 C6F3I3

1,7-二羟萘：160.171,7- two hydroxy naphthalene：575-38-2 C10H8O2

菜豆凝集素(PHA)ELISA检测试剂盒 小鼠 IL13 / ALRH 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

人 EIF2C4 基因全长ORF克隆

人 CPB1 / PCPB 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 HSBP1 基因全长ORF克隆

食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 PFKL 基因全长ORF克隆

甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全长ORF克隆 (密码子优化)(表达载体)

人 HTRA2 基因全长ORF克隆

人 KLRK1 / CD314 / NKG2D 基因全长ORF克隆

人 TrkA / NTRK1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

人 GDF5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择

：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板
、试管、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应

，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度
。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml
。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择
：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应
，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用

，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 
。