老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存

，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液

。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下
。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

产品名称：蛋白激酶受体A4ELISA检测试剂盒
英文名称：Tyrosine protein kinase receptor A4
产品货号：EY-E99033
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格
：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清
，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激
。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎
。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人前列腺特异膜抗原(PSMA)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺素F(PGF)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺素E2(PGE2)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺素E1(PGE1)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺干细胞抗原(PSCA)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列腺分泌蛋白94（PSP94）ELISA 试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前列环素(PGI)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前胶原C端肽酶(PCP)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人前白蛋白(PA)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人迁移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA 试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA  试剂盒  96T/48T 试剂盒 组装/原装

蛋白激酶受体A4ELISA检测试剂盒H1299人肺癌细胞1ml/T75

TKB-1人肺癌细胞1ml/T75

LTEP-a-2人肺腺癌细胞1ml/T75

Lu-165人肺腺癌细胞1ml/T75

NCI-H520人肺鳞癌细胞1ml/T75

NCI-H2170人肺鳞癌细胞1ml/T75

LTEP-s人肺鳞癌细胞1ml/T75

SK-MES-1人肺鳞癌细胞1ml/T75

NCI-H596人肺腺鳞癌细胞1ml/T75

NCI-H1650人肺支气管癌细胞1ml/T75

BEAS-2B人支气管上皮样细胞1ml/T75

PG-BE1人肺巨细胞癌高转移细胞株1ml/T75

PG-LH7人肺巨细胞癌低转移细胞株1ml/T75

FaDu人咽鳞癌细胞1ml/T75

ELISA 试验时，注意事项如下
： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性

。有时本底较高
，说明有非特异性反应
，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板
、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性

，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度

，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度
。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护

。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后
，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制

，尤其是H2O2在临用前加入 。