老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存
，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用
。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

产品名称：去乙酰化酶Sirtuin-1ELIS检测试剂盒
英文名称
：NAD-dependent deacetylase sirtuin-1
产品货号：EY-E97548
产品规格：48T/96T
产品保存

：2-8℃

，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本
，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本
：体液，血清
，血浆，细胞培养上清液
，尿液，组织匀浆,心房水标本等等

。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后
，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测
。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

。

泛酸测定培养基/Pantothenic Acid Assay Medium婴儿食品和粉中泛酸测定250克国产/进口

酒假丝酵母 Candida kefyrCT26.WT(小鼠结肠细胞)

猪霍乱沙门氏菌 Salmonella cholerae-suis嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

叠氮钠葡萄糖肉汤/Azide Dextrose Broth链球菌、肠球菌、粪链球菌的增菌培养250克国产/进口

人卵巢细胞COC1

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞raw264.7

琼脂/Gentamycin Agar用于霍乱弧菌的分离培养250克国产/进口

硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)重组蛋白Recombinant Heparan Sulfate Proteoglycan (HSPG)

SW1116(人结肠腺细胞)斯氏假单胞菌 Pseudomonas stutzeri

神经胶质瘤G422瘤

人肝星形细胞LX-2

去乙酰化酶Sirtuin-1ELIS检测试剂盒乙型肝炎二对半全套（立可读） 96T

乙型肝炎表面抗原HBsAg 96T

乙型肝炎表面抗体HBsAb 96T

乙型肝炎e抗原HBeAg 96T

乙型肝炎e抗体HBeAb 96T

乙型肝炎表面抗原HBsAg(立可读) 96T

乙型肝炎核心抗体HBcAb 96T

乙型肝炎表面抗体HBsAb(立可读) 96T

乙型肝炎e抗原HBeAg(立可读) 96T

乙型肝炎e抗体HBeAb(立可读) 96

乙型肝炎核心抗体HBcAb(立可读) 96T

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性。有时本底较高

，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体
，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1

、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值

。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应
，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护

。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体
。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入 。