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原代細胞的分離與培養
點擊次數 :653 更新時間 :2020-07-24
   原代細胞是指來源活體組織 ,經過特定分離方法製備而成的初始細胞 。
  原代細胞離體時間短且不經過永生化過程 ,其生物學特性未發生很大變化 ,仍保持原有的遺傳特征 ,可更好地反映細胞在體內的生長狀態 ,從而獲得與體內生理功能更接近的數據 ,很適合用於藥物測試 、細胞分化和轉化等實驗研究 。
  原代細胞是出了名的難養 ,對培養環境和實驗操作的要求更苛刻 。細胞在體外通常隻能傳代少數幾次 ,某些細胞(如神經元細胞)甚至無法進行傳代 。對於研究人員來說 ,如何才能經濟高效地培養好細胞 ,並圍繞這有限幾次傳代的細胞設計實驗 ,是更大的一個挑戰 。
  原代細胞是取材於切除的動物組織 ,通過酶處理 ,在適當的條件下培養直至達到足夠的數量 。分離的細胞有兩種類型 :貼壁細胞(錨定依賴性生長)和懸浮細胞(錨定非依賴性) ,貼壁細胞多來自器官組織 ,而懸浮細胞多來自血液係統的細胞 。
  從組織製備細胞 ,即使捱過了極其嚴苛的解離步驟 ,不嚴謹的分離操作可能會導致細胞生長緩慢 、表型不一致甚至細胞汙染,特別是由於組織中可能含有細菌等微生物 ,汙染問題對於細胞的分離和培養是一個很大的隱患 。而為了讓研究人員不再為這些問題頭疼 ,現在已經出現了一些細胞公司可供應現成的細胞 ,並對應配有充分優化的培養基和實驗方案 ,這使得細胞的培養和研究比以往要輕鬆得多 。
  而對於具備自主從組織中獲取細胞的實驗室 ,也建議以商業化的細胞作為對照 ,采用均一性和穩定性更好的P2/P3代次進行實驗 ,並用專門的細胞培養基進行培養 ,zui大限度提高原代細胞的生長 。
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