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IL-22 Elisa Kit中常見問題及解決方法
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:788 更新時間
:2018-04-11
IL-22 Elisa Kit中常見問題及解決方法
IL-22 Elisa Kit試驗以靈敏度較高
、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用
,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大
,如不注意
,有可能導致顯色不全
、花板等結果
。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結於下
,以期給同行帶來一些啟發
,提高試驗質量
。下麵分析IL-22 Elisa Kit試驗操作中可能影響結果的原因
,並給出相應的解決辦法
。
一
、選擇試劑
選擇質量優良的檢測試劑
,嚴格按照試劑說明書進行操作
,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鍾
。
二
、加樣
可能原因
:
1)IL-22 Elisa Kit血清或血漿標本分離不好即進行加樣
; 2)手工操作中
,加樣板過多造成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)
; 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外
。
解決辦法
:
1) 標本為血清
:將血液先自然存放1-2小時後
,再用3000rmp離心15分鍾
;標本為血漿
:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管
,采血後必須立即顛倒混合5-10次
,放置一段時間後
,3000rpm離心15分鍾
;若在幾天內檢測
,可放在2-8℃冰箱中
,若要貯存
,則置於-20℃的低溫冰箱內
。 2) 加樣後及時放入孵箱
。 3) 加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹
。 4) 如果采用AT或其他全自動加樣
,IL-22 Elisa Kit選擇FAME或其他後處理儀器加酶試劑
。 5) 標本較多時
,請分批操作
。
三
、 孵育
可能原因
:
1) 孵育時未貼封片或加蓋
,使標本或稀釋液蒸發
,吸附於孔壁
,難於清洗*
; 2) 孵育時間人為延長
,導致非特異性結合緊附於反應孔周圍
,難以清洗*
。
解決辦法
:
1) 貼封片或加蓋
; 2) 按說明步驟嚴格控製操作時間
。
四
、洗板
IL-22 Elisa Kit可能原因
:
1) 采用手工洗板
,孔與孔之間液體交叉
。 2) 采用半自動洗板機洗板時
,洗液量不足
,導致洗板不*
;洗板針堵塞
,抽吸不*
;洗板不暢
,導致洗板效果差
。 3) 反應板過多造成洗板等待時間長
。
解決辦法
:
1) 保證洗液注滿各孔
,洗板針暢通
,洗完板後在吸水紙(選擇幹淨
、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍幹
; 2) 合理安排
,或多用幾台洗板機
。
五
、顯色
可能原因
:
1) IL-22 Elisa Kit顯色劑配製後放置時間過長或使用過期顯色劑
; 2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流
。
解決辦法
: 1) 顯色劑盡量在臨用前配製
,堅持不用過期顯色劑
,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用
; 2) 加樣時保持顯色劑不外流
; 3) A
、B液應避免接觸金屬器械
。
六
、終止
可能原因如加終止液時產生較多氣泡
,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡
。
七
、讀板
如讀板時板底不清潔等
。應保證酶標板清潔
。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸
; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化
,有效提高檢測質量
。
IL-22 Elisa Kit在實際操作中
,除了選擇優良試劑外
,必須嚴格按照操作步驟進行操作
,同時作好室內質控
、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本
,才能保證檢測質量
。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀
,這對於實現ELISA標準化檢測
、提高檢測質量起到了重要作用
。
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