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GSK Elisa Kit的模式及具體的實驗條件
點擊次數 :862 更新時間 :2018-03-05

通常在板孔中加入包被液後 ,在4-8℃冰箱中放置過夜 ,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果 。包被的zui適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化 ,每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定 。一般蛋白質的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml 。
封閉是否必要 ,取決於ELISA的模式及具體的實驗條件 。並非所有的ELISA固相均需封閉 ,封閉不當反而會使陰性本底增高 。一般說來 ,雙抗體夾心法 ,隻要酶標記物是高活性的 ,操作時洗滌* ,不經封閉也可得到滿意的結果 。特別是用單抗腹水直接包被時 ,因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表麵 ,業已起到了類似封閉劑的作用 。但在間接法測定中 ,封閉一般是不可少的(見2.2.2)。包被好的ELISA板幹燥後放入密封袋或錫袋中 ,在低溫可保存數月 。
封閉(blocking)是繼包被之後用高濃度的無關蛋白質溶液再包被的過程 。抗原或抗體包被時所用的濃度較低,吸收後固相載體表麵尚有未被占據的空隙 ,封閉就是讓大量不相關的蛋白質充填這些空隙 ,從而排斥在ELISA試劑盒其後的步驟中幹擾物質的再吸附 。封閉的手續與包被相類似 。zui常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白 ,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的 。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其zui大的特點是價廉 ,可以高濃度使用(5%) 。高質量的速溶食用低脂奶粉即可直接當作封閉劑使用 ,但由於奶粉的成份複雜 ,而且封閉後的載體不易保存 ,因此在試劑盒的製備中較少應用 。
151006-14-3         普伐他汀1 ,1 ,3 ,3-四甲基氨基丁烷標準品    200mg
1508-76-5     Procyclidine Hydrochloride    鹽酸丙環定標準品    200mg
1508-75-4     Tropicamide    標準品    200mg
1508-65-2     Oxybutynin Chloride     氯化奧昔布寧標準品    200mg
150399-21-6    Balsalazide Disodium    標準品    200mg
150-13-0    Aminobenzoic Acid    氨苯甲酸標準品    200mg
149845-06-7     Saquinavir Mesylate     甲磺酸沙奎拉韋標準品    200mg
149-32-6    Erythritol    赤蘚糖醇標準品    200mg
148408-66-6    Docetaxel    三水多烯標準品    200mg

 

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