的工作原理主要有兩種
,正向選擇和負向選擇
。正向選擇的試劑盒直接結合的抗體來進行捕獲
。這種抗體通常與磁珠相連
,可以利用磁鐵將懸液中的抗體-磁珠-複合物提取出來
,再通過二抗將磁珠與目標分開
。負向選擇的試劑盒也采用類似的抗體包被磁珠
,不過這種試劑盒是通過去除樣品中的非目的
,來間接捕獲目的
。
這兩種細胞分離試劑盒如何取舍
,主要取決於目標細胞的表麵是否具有特異性強的篩選標誌。這樣的篩選標誌能夠實現特異性的捕獲
,避免所獲得的細胞被非目標細胞汙染
。如果你的目標細胞剛好具有這樣的篩選標誌
,那麽正向選擇的細胞分離試劑盒就是選擇
。但如果目標細胞並不具有特異性強的篩選標誌
,那老哥俱樂部還是選用負向選擇的細胞分離試劑盒
。
篩選標誌的確定
通過PubMed等數據庫中的文獻
,老哥俱樂部一般可以確定在目標上表達的篩選標誌
。如果文獻中找不到適合自己的表麵標誌
,老哥俱樂部還可以用目標的DNA序列進行BLAST
。BLAST結果會顯示,目標細胞上可能表達的表麵標誌
,在此基礎上可以選取用於捕獲的細胞表麵蛋白
。舉例來說
,對一個T進行BLAST
,結果會顯示該是否表達CD4或CD8
。在得知目標表達CD4之後
,老哥俱樂部可以先對樣品進行一個免疫實驗(如ELISA)
,以檢驗BLAST的結果
。一旦證實目標的確表達CD4
,老哥俱樂部就可以用相應試劑盒來篩選CD4陽性的T細胞
。
英文縮寫: 磷酸化Disabled 1抗體 Phospho-Dab1 (Tyr220)
英文縮寫
: 磷酸化Disabled 1抗體 Phospho-Dab1 (Tyr232)
英文縮寫
: 磷酸化Disabled 1抗體 Phospho-Dab1 (Ser491)
英文縮寫
: 雙皮質素抗體 Doublecortin
英文縮寫
: D激酶衰減蛋白2抗體 DOK2
英文縮寫
: 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體 Phospho-DOK2 (Tyr351)
英文縮寫
: 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體 Phospho-DOK2 (Tyr299)
英文縮寫
: 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體 Phospho-DOK2 (Tyr142)
英文縮寫
: 膀胱癌缺失基因1 DBC1/deleted in bladder cancer 1
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