V佐劑主要可分為兩種
:一種本身具有免疫原性
,如百日咳杆菌
、抗酸杆菌(結核分枝杆菌)以及革蘭陰性杆菌等
;另一種本身無免疫原性
,如
、磷酸鈣
、礦物油乳劑
、表麵活性劑等
。目前應用*多的是弗氏佐劑(Freund adjuvant)
。
1.弗氏佐劑 弗氏佐劑是目前動物實驗中*常用的佐劑
,分為不*弗氏佐劑和*弗氏佐劑
。不*弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成
,組分比為1~5
:1
,可根據需要而定
,通常為2
:1
。不*佐劑中加卡介苗(*終濃度為2~20mg/ml)或死的結核分枝杆菌
,即為*弗氏佐劑
。上述佐劑經高壓滅菌後
,低溫保存備用
。
在免疫動物前
,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合
,製備成 "油包水"乳狀液
。佐劑和抗原體積比一般為1
:1
。佐劑與抗原乳化可按如下方法進行
:
(1) 研磨法
:先將佐劑加熱並取適量放入無菌的玻璃研缽內
,待冷卻後再緩緩滴入等體積的抗原溶液
,邊滴邊按同一方向研磨
,滴加抗原的速度要慢
。待抗原全部加入後
,繼續研磨一段時間
,使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑
。本法適於製備大量的佐劑抗原
,缺點是研缽壁上粘附大量乳劑
,抗原損失較大
。
(2) 注射器混合法
:將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個注射器內
,兩注射器之間以一細膠管相連
,注意排淨空氣,然後交替推動針管
,直至形成粘稠的乳劑為止
。本法優點是容易做到無菌操作
,適用於製備少量的抗原乳劑
。 製備好的乳化劑經鑒定才能適用
。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中
,若保持完整不分散
,成滴狀浮於水麵
,即乳化*
,為合格的油包水劑
。
2.佐劑 取5%硫酸鋁溶液250ml
,在強烈攪拌下加入5%氫氧化鈉溶液100ml
,用生理鹽水離心洗滌沉澱2次
,再懸入生理鹽水中使達250ml
。免疫接種時
,取適量佐劑加等體積抗原即可免疫
。
3.明礬佐劑 鉀鋁礬(硫酸鋁鉀)在一定pH條件下產生膠體吸附抗原而產生佐劑效應
。製備方法是用生理鹽水溶解蛋白質抗原
,在攪拌下緩慢滴入一定量10%硫酸鋁鉀溶液
,用NaOH調pH到6.5
,此時溶液變成乳狀懸液
,離心後去掉上清液
,沉澱用生理鹽水洗滌二次
,加入硫柳汞防腐
,4℃保存備用
。明礬佐劑一般用於肌肉注射
,皮下注射容易引起肉芽腫和膿腫
。
4.V脂質體 脂質體包封抗原後
,可使抗原延緩釋放
,並且脂質體顆粒有刺激機體免疫反應的作用
。因此
,用脂質體包封的抗原免疫動物可提高免疫效果
。
Octoxynol 9 9002-93-1 200ml 辛苯聚糖標準品
Lanolin (20 g) 8006-54-0 20g 羊毛脂標準品
Zonisamide Related Compound A 73101-64-1 20mg 唑尼沙胺相關物質A標準品
23-EPI-26-Deoxyactein 264624-38-6 20mg 脫氧升麻烴標準品
Abacavir Sulfate Racemic 188062-50-2 20mg 外消旋阿巴卡韋標準品
Actein 18642-44-9 20mg 黃肉楠堿標準品
Amiodarone Related Compound D 51-26-4 20mg 胺碘酮相關物質D標準品
Amiodarone Related Compound H 869-24-9 20mg 胺碘酮相關物質H標準品
beta-Chlorogenin 20mg 綠蓮吉寧標準品
Cladribine Related Compound A 24757-70-8 20mg 克拉曲濱相關物質A標準品
V