老哥俱乐部

　　胎盘泌乳素Elisa试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理

，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。样品和标记抗体先后加入酶标板孔反应后
，PBS或TBS洗涤
。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色
。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

　　1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。

　　2．将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。

　　3．酶标板加上盖，37℃反应90分钟。

　　4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体
，再对着吸水纸拍几下
。洗涤2次。

　　5．胎盘泌乳素Elisa试剂盒将准备好的抗体工作液按每孔0.1ml依次加入
。37℃反应60分钟
。

　　6．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤3次，每次浸泡1分钟左右。

　　7．将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟
。

　　8．0.01MTBS或0.01MPBS洗涤5次
，每次浸泡1-2分钟左右。

　　9．按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液，37℃避光反应
，反应过程中
，要经常的观察，当肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色
，后3-4孔差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔。（显色反应zui长不要超过30分钟）。

　　10．用酶标仪在450nm测定O.D.值。

　　11．胎盘泌乳素Elisa试剂盒根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N
。