胎盤泌乳素Elisa試劑盒是基於經典酶聯夾心技術原理 ，隻能用於研究用途 ，不得用於醫學診斷 。樣品和標記抗體先後加入酶標板孔反應後 ，PBS或TBS洗滌 。隨後加入過氧化物酶標記的親和素反應 ；經過PBS或TBS的*洗滌後用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色 ，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色 。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關 。

　　1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目 。

　　2．將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中 ，1孔隻加樣品稀釋液的作為對照 。處理後的標本按100ul每孔加入 。

　　3．酶標板加上蓋 ，37℃反應90分鍾。

　　4．反應後用自動洗板機吸去酶標板內的液體；或甩去酶標板內液體 ，再對著吸水紙拍幾下 。洗滌2次。

　　5．胎盤泌乳素Elisa試劑盒將準備好的抗體工作液按每孔0.1ml依次加入 。37℃反應60分鍾 。

　　6．0.01MTBS或0.01MPBS洗滌3次 ，每次浸泡1分鍾左右 。

　　7．將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入 。37℃反應30分鍾 。

　　8．0.01MTBS或0.01MPBS洗滌5次 ，每次浸泡1-2分鍾左右 。

　　9．按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液 ，37℃避光反應 ，反應過程中 ，要經常的觀察 ，當肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色 ，後3-4孔差別不明顯時，即可加入TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應zui長不要超過30分鍾） 。

　　10．用酶標儀在450nm測定O.D.值 。

　　11．胎盤泌乳素Elisa試劑盒根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算 。應記住由於樣品稀釋了N倍 ，其實際濃度應該×N 。