常用的檢查方法及它的采集保存妙招
* 、魚類ELISA試劑盒的常用的檢查方法
良好的ELISA板應該是吸附性能好 ,空白值低 ,孔底透明度高 ,各板之間 、同一板各孔之間 、同一板各孔之間性能相近 。聚苯乙烯ELISA板由於原料的不同和製作工藝的差別 ,各種產品的質量差異很大 ,因此 ,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能 。
常用的檢查方法為 :以一定濃度的人IgG包被ELISA板各孔 ,洗滌後每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體 ,保溫後洗滌 ,加底物顯色 ,終止酶反應後 ,分別測每孔溶液的吸光度 。控製反應條件 ,使各孔讀數在吸光度0.8左右 。計算全部讀數的平均值 。所有單個讀數與全部讀數的均數之差 ,應小於10% 。
第二 、魚類ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1.血清 :全血標本請於室溫放置2小時或4℃過夜後於1000 x g離心20分鍾 ,取上清即可檢測 ,或將標本放於-20℃或-80℃保存 ,但應避免反複凍融 。
2.血漿 :可用EDTA或肝素作為抗凝劑 ,標本采集後30分鍾內於2 - 8° C 1000 x g離心15分鍾 ,或將標本放於-20℃或-80℃保存 ,但應避免反複凍融 。
3.細胞培養物上清或其它生物標本 :請1000 x g離心20分鍾 ,取上清即可檢測 ,或將標本放於-20℃或-80℃保存 ,但應避免反複凍融 。
注:以上標本置4℃保存應小於1周 ,-20℃或-80℃均應密封保存 ,-20℃不應超過1個月 ,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響zui後檢測結果 ,因此溶血標本不宜進行此項檢測 。
第三 、魚類ELISA試劑盒的嚴格要求
在魚類白介素1βELISA試劑盒 中一般有二次抗原抗體反應 ,即加標本後和加結合物後 ,此時反應的溫度和時間應按規定的要求 ,保溫容器是水浴箱 ,可使溫度迅速平衡 。各ELISA板不應疊在一起 。為避免蒸發 ,板上應加蓋 ,或將板平放在底部墊有濕紗布的濕盒中 。濕盒應該是金屬的 ,傳熱容易 。如用保溫箱 ,空濕盒應預先放在其中 ,以平衡溫度 ,這在室溫較低時更為重要 。加入底物後 ,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求 。如室溫高於20℃ ,ELISA板可避光放在實驗台上 ,以便不時觀察 ,待對照管顯色適當時 ,即可終止酶反應 。
第四 、魚類ELISA試劑盒特異性
魚類甲狀腺素(T4)ELISA試荊盒用於檢測待測物質 ,經檢測與其它相儀物質無明顯交叉反應.由於受到技術及樣本來源的限製 ,不可能完成對所有相關或相儀物質交叉反應檢測 ,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應.
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