操作中應注意以下5個方麵 。
1.隨著病情的進展或由其他因素影響 ,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動 ,因此有必要對標本進行預處理 ,例如對血清標本作適當稀釋 ,或離心分離血脂等 。間接法測定中 ,標本適當稀釋還可降低非特異性反應 。
2.加樣一般使用加液器 ,在ELISA中一般有4次加樣 :加標本 、加酶結合物 、加底物和加終止液 。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴 ,以免交叉汙染 。加酶結合物 、底物和終止液時則不需更換吸嘴 。
3.在成批手工檢測中 ,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異 ,使抗原抗體反應和酶促反應時間不* ,對競爭法及定量檢測影響很大 ,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準 。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟 。目的是除去未結合的免疫反應物 ,終止抗原抗體反應 ,除去標本中與反應無關的成分 、遊離的酶標物以及反應過程中吸附於固相載體上的非特異性物質 。可用洗板機洗板或手工洗板 ,前者洗滌質量較好 ,各反應孔洗滌效果均一 ,批內 、批間差異小 ,手工洗板應注意控製各孔洗滌效果 ,差異不宜太大 。
5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀) ,比色法判讀可選擇單波長或雙波長 ,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片 ,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值) 。酶標儀具有良好的重複性 。
人酸性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
人四氫生物蝶呤(BH4)免疫試劑盒
人四連接素(CLEC3B)免疫試劑盒
人死亡相關蛋白1(DAP/DAP1)免疫試劑盒
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)免疫試劑盒
人絲蟲病抗體(IgG4)免疫試劑盒
人瞬態電壓感受器陽離子通道,子類V,成員4(TrpV4)免疫試劑盒
人瞬態電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1(TrpV1)免疫試劑盒
人瞬時受體電位陽離子通道,亞科C,成員6(TRPC6)免疫試劑盒
人水閘蛋白14(CLDN14)免疫試劑盒
人水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
人水通道蛋白4抗體(AQP-4 Ab)免疫試劑盒
人水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒
人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)免疫試劑盒
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)免疫試劑盒
人雙氫睾酮(DHT)免疫試劑盒
人衰變加速因子(DAF/CD55)免疫試劑盒
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒抗原免疫試劑盒