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​小鼠Ca-ATP酶elisa檢測試劑盒操作注意的5個方麵
點擊次數 :441 更新時間 :2022-02-17

操作中應注意以下5個方麵 。


1.隨著病情的進展或由其他因素影響 ,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動 ,因此有必要對標本進行預處理 ,例如對血清標本作適當稀釋 ,或離心分離血脂等 。間接法測定中 ,標本適當稀釋還可降低非特異性反應 。


2.加樣一般使用加液器 ,在ELISA中一般有4次加樣 :加標本 、加酶結合物 、加底物和加終止液 。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴 ,以免交叉汙染 。加酶結合物 、底物和終止液時則不需更換吸嘴 。


3.在成批手工檢測中 ,還應注意操作時差的影響 。加樣及混勻時間的差異 ,使抗原抗體反應和酶促反應時間不* ,對競爭法及定量檢測影響很大 ,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準 。


4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟 。目的是除去未結合的免疫反應物 ,終止抗原抗體反應 ,除去標本中與反應無關的成分 、遊離的酶標物以及反應過程中吸附於固相載體上的非特異性物質 。可用洗板機洗板或手工洗板 ,前者洗滌質量較好 ,各反應孔洗滌效果均一 ,批內 、批間差異小 ,手工洗板應注意控製各孔洗滌效果 ,差異不宜太大 。


5.準確判定結果須使用ELISA測讀儀(酶標儀) ,比色法判讀可選擇單波長或雙波長 ,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片 ,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值(A值) 。酶標儀具有良好的重複性 。

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