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      人乳铁蛋白(hLTF)转基因成分核酸检测试剂盒反应五要素
      点击次数:941 更新时间:2021-10-20

      反应五要素 :

      参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

      引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上 ,只要知道任何一段模板DNA序列 , 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物 ,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增 。设计引物应遵循以下原则:

      ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

      ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段 。

      ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列 。

      ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

      ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

      ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点 , 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点 , 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

      ⑦引物的特异性 :引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性 。

      引物量 :每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增 ,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

      ANGEL2蛋白抗体

      ANKLE2蛋白抗体

      特异性锚样蛋白1抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白22抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白50抗体

      氢离子转运ATP合成酶6G抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白26抗体

      锚蛋白重复结构域蛋白26抗体

      丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体

      芳香基硫酸酯酶K抗体

      神经元突触前膜蛋白抗体

      锚定蛋白G抗体

      肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体

      整合素样金属蛋白酶与1型抗体

      整合素样金属蛋白酶与1型-7抗体 (N端抗体)

      整合素样金属蛋白酶与1型-7抗体

      内收蛋白抗体

      脂肪组织分化相关蛋白抗体

      脂联素受体1抗体

      肾上腺髓质素受体抗体

      脂联素抗体

      肾上腺髓质素抗体

      腺苷受体A3抗体

      ADRA2肾上腺素能受体2抗体

      肾上腺素能受体β1抗体


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